Можно ли мембрану стирать обычным порошком: Можно ли стирать мембранную одежду в стиральной машине

как правильно стирать в стиральной машинке, гелем, жидкостью или порошком

Изначально мембранная одежда придумана была для спортсменов. Но, благодаря своим свойствам не пропускать влагу и хорошо удерживать тепло, она приобрела популярность в повседневной носке. Особенно детские вещи. С ростом популярности таких вещей на рынке появились средства для стирки мембранной одежды. Их огромный выбор может запутать покупателя.

Мембранная одежда помогает любителям активного отдыха оставаться сухими независимо от погодных условий.

Более того, помимо хорошего средства, нужно выбрать правильный режим чистки. Разберем подробно, как и чем можно безопасно постирать мембранную одежду.

Средства для стирки мембранной одежды

Мембрана – это тонкая пористая прослойка между верхним и нижним слоем ткани в одежде. Именно она отвечает за водонепроницаемость и удержание тепла.

Мембранные куртки сделаны из материалов, которые позволяют пару проходить наружу, но не пропускают капли воды внутрь.

Эти функции выполняются за счет пористой структуры мембраны. Именно поэтому стирать ее обычными порошками нельзя, так как его частицы забивают микропоры, и мембрана быстро приходит в негодность, переставая выполнять свои функции. Поэтому важно подобрать спецсредство, предназначенное для чистки мембранных изделий.

Даже если внешний материал промокнет, внутри мембранного изделия будет сухо.

Важно! Стирать мембранную одежду обычным порошком категорически запрещается.

Специальные средства существуют в разных видах: порошки, спреи, шампуни, гели. Поэтому каждый найдет удобное именно для себя средство. Разберем их особенности, преимущества и недостатки.

Ассортимент очистительных средств позволяет качественно ухаживать за одеждой.

Гели

Гель – одна из самых удобных форм средств для чистки мембран. Он подойдет как для автоматического, так и для ручного режима.

Предпочтительно для стирки мембранной одежды использовать специальные средства.

Лучшие гели от производителей:

  • Denkmit Fresh Sensation. Бюджетный вариант, но отлично зарекомендовал себя в качестве чистящего средства. Единственный минус – отсутствие спец пропитки для восстановления волокон мембраны. Отлично подходит для совместного использования со специальным спреем-пропиткой.
  • Perwoll Sport & Active. Гель для спорт-одежды. Подходит также при чистке обуви. Чтобы применять для мембранных изделий, смотрите специальное указание на этикетке Membrane Function.
  • Burti Sport & Outdoor. Гель-концентрат, содержит фосфонаты, анионные и неионные тензиды, хорошо борется с загрязнениями, сохраняя мембрану. Предназначен для цветного, темного и светлого белья. На упаковке обязательно должно быть указание ” для спортивной одежды”.
  • Гель Unicum для спорт. вещей. Подойдет также для чистки пуховиков и курток. Бережно очищает мембрану, не нанося повреждений. Не содержит фосфатов. Предназначен для ручного способа.
Гели универсальны для большинства материалов спортивной и аутдор-одежды.

Гели в основном имеют высокую концентрацию чистящего вещества. Во время их применения нужно четко соблюдать дозировку, указанную на упаковке. В противном случае могут забиться поры мембраны.

Порошки

Порошок имеет в составе чистящее вещество крупной фракции. Даже растворяясь в воде оно проникает в поры мембраны, забивая ее. Поэтому средства для стирки мембранной одежды выпускается только в форме геля и жидкостей, содержащие специальные очищающие элементы.

Мембранную одежду можно стирать несколькими способами.

Если под рукой не оказалось специального средства, не применяйте обычный стиральный порошок, а воспользуйтесь следующим лайфхаком.

На заметку! Хозяйственное мыло отлично подойдет для стирки мембранной одежды.

Температура воды при стирке этого материала не должна превышать 40 градусов.

Возьмите крупную терку, натрите хозяйственное мыло. Добавьте воды, и тщательно размешайте до состояния геля или жидкости. Полученное средство добавляется в барабан стиральной машины, специальный отсек для жидкого моющего средства, или в таз при ручной стирке. Количество моющего вещества зависит от объема вещей.

Шампуни

Такая форма выпуска наиболее популярная. Шампунь можно добавлять в отсек для жидких порошков или специальную емкость, которая затем помещается в барабан.

Машинная чистка мембраны будет безопасной, если соблюдать рекомендации.

Лучшие производители шампуней:

  1. NIKWAX.
  2. Nordland.
  3. Henkel.
  4. Upeco.
  5. Domal.
  6. HEITMANN.

Среди них вы найдете дорогостоящие шампуни, использующиеся при стирке мембранной одежды для охоты, рыбалки, спорта. Также производители имеют более дешевые линейки для чистки повседневных мембранных изделий, которые имеют более простую структуру, нежели специальные спортивные.

Лучшие шампуни:

  • Sport Fein Fashion от DOMAL. Содержит неионные и анионные ПАВ, в качестве дополнительного компонента – пшеничный протеин. Благодаря этому данная жидкость бережно очищает одежду от загрязнений и восстанавливает мембрану.
  • Tech Wash от Nikwax. Специальное средств, предназначено для чистки только мембраны, не подходит для пуховиков и курток. Представляет собой 30 процентный раствор калийного мыла в воде.
  • Washbalsam. Содержит анионные и неионные ПАВ, а также пятипроцентный раствор калийного мыла и энзимы. Подходит для спортивной обуви, одежды, а также термобелья и пуховиков.
  • Activ & Fresh от Ласки. Henkel хорошо зарекомендовал себя в мире чистящих средств для одежды. Актив фреш бережно очищает спортивные вещи, а также мембранные компоненты, сохраняя их функции. Содержит фосфонаты.
  • SALTON sport. Содержит натрия хлорид и гидроксид, динатриевую соль, ПАВ. Предназначен для климатических вещей с мембраной, в основном – теплых комбинезонов и термобелья.
  • Spezial wacche. Предназначен для стирки верхней одежды. Подходит для цветных и черных вещей. Бережно удаляет загрязнения и сохраняет яркость цвета.
Сегодня существует большое количество средств для мембранных тканей.

Выбор жидких средств очень большой. Лучше приобретать те, что не содержат фосфатных или натриевых солей, а также с добавлением специальной пропитки, которая способствует восстановлению мембраны.

Спрей

Для стирки специально разработаны жидкие средства: гели и шампуни. Спреи не помогут полноценно удалить загрязнения, но способны освежить внешний вид и избавиться от неприятных запахов. Это своеобразная реанимация в случае, когда нет возможности скорой стирки.

Для чистки одежды из мембранных тканей используйте специальные чехлы.

Важно! Спреи не подходят для полноценной стирки.

Также существуют спреи для, которые поддерживают выполнение функций мембраны: влагоотталкивающие и аккумулирующие тепло. Ими обрабатывают вещь, чтобы продлить срок ее службы.

Мембранная ткань требует особого подхода при стирке.

Также их используют в комбинации с шампунями и гелями, не имеющих в составе специальных компонентов, которые пропитывают мембрану, сохраняя и восстанавливая ее волокна.

Пропитывающие спреи для поверхностной обработки мембранной одежды:

  • Grangers Clothing Repel.
  • Nikwax TX. Direct Spray-on.
  • Grangers Performance Repel Spray.
  • Toko Eco Textile Proof.
Мембранная одежда не пропускает влагу.

Ими обрабатывают только наружную часть вещи, не прилегающую к коже. Использовать только на чистой вещи. Если в средстве для стирки уже содержится пропитка, необходимости в дополнительном приобретении спрея нет.

Покупайте качественные средства для очистки одежды.

Также в продаже есть освежающий спрей Odour Eliminator от Grangers, предназначенный для удаления неприятных запахов со спортивной одежды и обуви. Борется только с запахами, не содержит очищающих элементов!

Чем противопоказано стирать

Мы уже говорили, что мембрану нельзя стирать обычным порошком.

Также есть еще несколько средств, которые нельзя использовать для стирки мембранной одежды:

  • Хлорсодержащие вещества. Хлор оказывает перфорирующее действие, расширяя поры мембраны. После этого она начинает промокать, переставая выполнять водоотталкивающие свойства.
  • Ополаскиватель и кондиционер. Их действие направлено на смягчение волокон ткани. Таким образом они разрыхляют волокна мембраны, и она теряет свои свойства, начиная промокать и плохо удерживать тепло.
Большинство стиральных порошков не подходит для стирки мембраны.

Выбирайте подходящее средство для стирки, избегая запрещенных и переходите к стирке, которую также нужно правильно организовать.

Как правильно ее стирать

Существует два способа стирки любой мембраны: ручной и автоматический. Прежде чем приступить к стирке, запомните, что нельзя делать с мембранной одеждой:

  • Стирать при высоких температурах. Даже 40 градусов – это много. Подбирайте температуру воды не выше 30 градусов. Если жидкость предназначена для холодной стирки, можно взять воду комнатной температуры.
  • Отжимать. При стирке руками отжимать вещи, не скручивая или просто их стряхнуть. При машинной – ставить режим без отжима.
Хорошие моющие средства для мембраны должны иметь несколько отличий.

На самом деле, ограничений и правил немного, но их необходимо запомнить и соблюдать.

Руками

Если не знаете, как стирать мембранную одежду в стиральной машине или боитесь, воспользуйтесь для начала ручной стиркой.

  1. Наберите в таз воды так, чтобы она покрывала вещь.
  2. Добавьте жидкости для стирки в соответствии с указанной дозировкой.
  3. Постирайте одежду, стараясь не сильно тереть поверхность.
  4. Отожмите ее не выкручивая.
  5. Повесьте сушить на улице или на балконе подложив впитывающую тряпку.
Не пренебрегайте советами специалистов относительно стирки мембранной одежды.

Существует миф, что стирать мембранную одежду в стиральной машине нельзя. Поэтому многие боятся предавать ее машинной стирке. На самом деле, класть мембранные изделия в стиралку можно, только для этого нужно выбрать специальный режим.

Считается, что ручная чистка мембраны самая бережная.

В стиральной машинке

Стиралка также справится с мембранными изделиями, не нанося им вреда. Главное помнить, что температура стирки не должна превышать 30 градусов. Для этого нужно выбрать соответствующий режим.

Средства для стирки мембранных тканей в ассортименте есть в хозяйственных магазинах.
  1. Загрузите вещи в стиральную машину.
  2. В специальный отсек или баночку добавьте шампунь для стирки.
  3. Выберите деликатный режим.
  4. Поставьте режим без отжима.

По окончанию стирки совершите действия, аналогичны предыдущему параграфу.

Как сушить мембранную одежду, ухаживать после стирки

Такие вещи нужно сушить на балконе, подложив впитывающую тряпку, или на улице в тени.

Аккуратно обращайте с вещами из мембранной ткани.

Не допускать:

  • попадания прямых солнечных лучей;
  • сушки на батарее;
  • сушки вблизи источника тепла;
  • глажки.
Следуйте основным правилам ухода за мембранной одеждой.

Лучше всего хорошо расправить вещь и повесить ее на плечики в тень или на балкон. По окончанию сушки стряхнуть и повесить в шкаф.

Видео: как стирать мембранную одежду в стиральной машине

Чем стирать мембранную одежду в стиральной машине?

Технологический процесс неуловимыми темпами двигается вперед. Казалось бы, еще пять лет назад мало кто знал о существовании мембранной одежды. Сегодня же без нее не обходятся мамы малышей, спортсмены и просто обычные люди, желающие чувствовать тепло, несмотря на погоду. Вопрос о том, чем стирать мембранную одежду в стиральной машине, заботит многих, ведь ее практические свойства хочется сохранить как можно дольше.

Особенности и типы мембранной одежды

Несмотря на то, что мембрана начала применяться повсеместно не так давно, история ее уводит нас в далекий 1969 год. Именно тогда Билл и Роберт Гор смогли произвести уникальную ткань под названием Gore Tex. Прошло более шести лет, прежде чем материал появился в первой линейке одежды. Мембрана представляет собой тончайшую пленку с микропорами из вспененного политетрафторэтилена. Ее главные достоинства таковы:

  • Легкость;
  • 100% непропускание влаги внутрь;
  • Вывод влаги изнутри.
  • Материал «дышит».

Ткань имеет в своем составе 2, 3 или 2,5 слоя. В каждом из случаев мембранная пленка прикрепляется к изнаночной стороне основы и требует дополнительной подкладки. В трехслойном варианте подкладкой становится мелкая сетка из трикотажного волокна. В варианте, где 2,5 слоя, на основные слои напыляются мелкие вспененные трикотажные пупырышки.

Стоит отметить, что внешняя ткань также не остается без обработки и покрывается специальным составом DWR, обладающим дополнительными водоотталкивающими свойствами.

Нужно ли говорить, что такая многослойная и продуманная ткань не знает слова «промокнуть». Даже при истирании с верхней ткани покрытия DWR ткань, благодаря мембране никогда не пропустит влагу к телу. Кроме того, все швы в моделях проклеены, обеспечивая еще большую степень защиты. Сегодня существуют несколько типов мембраны:

  • Гидрофильная. Гидрофильная мембрана ушла от ключевого понятия мембраны и наличия пор. В этом виде поры отсутствуют, а потому конденсат от испарений тела при физических нагрузках оседает на внутренней поверхности. Далее по принципу диффузии влаги частицы пота выходят на внешнюю поверхность;
  • Поровая. Поровый Gore Tex также не промокает, хоть и имеет поры. Секрет здесь заключается в их минимальном размере, который капля дождя превышает в десятки раз. Через поры свободно выходит внутренняя влага, оставляя тело сухим. По сравнению с первым видом, к поровой разновидности при стирке нужно относиться максимально бережно;
  • Комбинированный тип сочетает в себе достоинства гидрофильного и порового материала. Мембрана здесь покрыта полиуретановой гидрофильной пленкой, что существенно сказывается на стоимости изделия.

Типы мембранной одежды в зависимости от предназначения:

  • Повседневная;
  • Профессиональная;
  • Для активных видов спорта.

К каждому из типов применяются свои требования. Так, повседневная мембрана отличается от других большим весом и количеством наполнителя. К этому виду относят костюмы, куртки и штаны для прогулок, а также комбинезоны для детей с рождения. Профессиональная серия подходит для альпинистов и лыжников. Третья же, самая легкая и невесомая, принадлежит одежде для бегунов и именуется Gore-Tex Active.

Можно ли стирать обычным порошком?

Мембрана – материал сложный, а потому уход за ним также должен быть деликатным. Только тогда куртка или комбинезон смогут прослужить долгое время, не растеряв своих водоотталкивающих свойств. Прежде чем понять, можно ли стирать обычным порошком мембрану, следует выяснить все составы, негативно влияющие на ткань. Итак, материал не выносит фосфатов и сульфатов, а значит, стирка обычным или жидким порошком даже самого лучшего качества запрещена. Нельзя подвергать мембрану отбеливателям и пятновыводителям, ведь в них производители также не могут обойтись без сульфатов.

Следует отметить еще одну процедуру, которую делать нельзя. Так, избрав машинную стирку, важно отказаться от режима «отжим», так как пленка не должна подвергается агрессивным скручиваниям. Возможно, сушка изделия в этом варианте будет гораздо дольше, однако безопасный для структуры результат стоит этого. Кроме того, само свойство мембраны позволяет удалять с нее загрязнения сразу и обычной водой, а потому стирка в машинке – процедура нечастая.

Необходимые средства для стирки

Обычными средствами стирать микропористую поверхность нельзя, однако есть одно привычное средство для стирки, которое можно использовать и для мембраны. Натуральное хозяйственное мыло без отдушек и прочих дополнений, выполненное по ГОСТу, прекрасно очищает любые загрязнения, как и сотни лет назад.

Для очищения с его помощью совсем не обязательно натирать им изделие. Крупная терка поможет изготовить мыльную стружку, которую можно будет хранить и использовать в нужный момент, добавляя в барабан стиральной машины.

Еще одно средство, помогающее при стирке – мягкий шампунь без использования сульфатов. Стирать мембранную одежду им не только безопасно, но и приятно. Легкий аромат шампуня будет всегда приятнее, нежели запах хозяйственного мыла. Здесь, впрочем, дело вкусовых предпочтений.

Использовать в стиральной машине можно и жидкое мыло. Оно также должно быть качественным и не содержать в своем составе вредных веществ.

Если же к вопросу стирки хочется подойти профессионально, лучше довериться специалистам и приобрести специальный гель-концентрат для мембраны. Называться он может по-разному, однако всегда имеет жидкую консистенцию. Любой спортивный магазин готов предложить несколько вариантов такой продукции, а потому проблем с поиском не возникает.

К сожалению, по незнанию люди часто допускают ошибки. Так, постирав единожды куртку обычным порошком, не стоит расстраиваться и смиряться с мыслью о ее безнадежности. 1-2 стирки не могут существенно повлиять на мембрану, однако, дальнейшие манипуляции следует проводить проверенными средствами.

Если же потеря функциональных качеств все-таки обнаружена, специалисты рекомендуют воспользоваться водоотталкивающим аэрозольным средством.

Подготовка одежды

Многие, впервые столкнувшись с особенностями стирки, решают избегать ее, ежедневно удаляя загрязнения влажной тряпочкой. Решение это отчасти верно, но все же стирка ручная или машинная присутствовать должна. Дело в том, что мембрана не только не пропускает внутрь себя воду, но и активно притягивает пыль. Засорение пор приводит к нарушению «дыхания» ткани, а значит, и к потери всего смысла свойств ткани. Специалисты рекомендуют стирать верхнюю одежду 2-3 раза за сезон.

Итак, если стирка уже запланирована, важно подготовить одежду. Для этого куртку, зимний костюм или комбинезон застегивают на все молнии, предварительно проверив карманы. В дополнение к этому отстегивают капюшон или при невозможности мех. Хрупкую фурнитуру, склонную к царапинам, заклеивают скотчем, что позволяет сохранить ее первозданный вид.

Горнолыжную и сноубордическую одежду подготавливают таким же образом. В некоторых советах можно увидеть идею о том, что нужно выворачивать костюм наизнанку. В действительности делать этого не стоит. Одежду для сноуборда застегивают и предварительно замачивают в специальном средстве в тазике на полчаса. После этого мягкой щеткой удаляют сложные загрязнения. Детская одежда при наличии сложных въевшихся пятен также заранее обрабатывается щеточкой со специальным средством или хозяйственным мылом.

Выбираем режим и температуру

Чтобы правильно постирать одежду из мембранной ткани, важно выбрать не только специальное чистящее средство, но и нужный режим и температуру. Так, современные машины уже давно оборудуются режимом «для мембраны», где с точностью определены доступная величина оборотов и температуры. Впрочем, есть такой режим не у всех, а значит, придется экспериментировать.

В каждой меню машинки можно найти деликатные режимы, будь то шелк, шерсть или ручная стирка. Их температура, как правило, не превышает 30-40 градусов, что не противоречит правилам ухода за мембранной одеждой. Отжим в таких режимах стоит на позиции 300-500 оборотов, что также вполне приемлемо, хоть и специалисты рекомендуют не отжимать мембранные вещи вовсе.

Как сушить?

Когда процедура стирки закончена, а стиральная машина подала завершающий сигнал, мокрую куртку или костюм укладывают на плотные махровые полотенца. Материал их должен быть выбран с учетом высокой поглощаемости влаги. Нужно заметить, что потребуется их немало. Итак, одежду выкладывают на горизонтальную поверхность на полотенца и начинают расправлять, разглаживая все складки и тем самым удаляя влагу. По мере намокания полотенец их заменяют на новые. В этом положении одежду оставляют до полного высыхания.

Важно запомнить, что сушить на обогревателях мембрану категорически запрещено, а потому важно предоставить одежде возможность медленно, но самостоятельно высохнуть в помещении с правильной циркуляцией воздуха. Для этого можно открыть окно и хорошо проветрить приспособленное место для сушки. Кроме того, мембрана боится не только обогревателей, но и прямых солнечных лучей, даже если стирка приходится на холодное время года.

Что и говорить, а стирка и сушка мембраны – дело не из легких, однако только в этом случае можно сохранить все полезные свойства этого уникального материала.

Советы и отзывы

Чтобы чистка изделий была максимально простой и понятной, а результаты совпадали с желаемыми, следует использовать в домашней практике несколько советов:

  • В первую очередь, качественная вещь всегда имеет подробную инструкцию по стирке изделия. Читать ее нужно и важно, ведь производитель знает лучше и точнее.
  • Специалисты советуют придерживаться правильной периодичности стирок и не загружать стиральную машинку при появившемся вдруг пятнышке. Мудрые хозяйки удаляют мелкие пятна моющими средствами, например, Fairy, смачивая в них ватный диск и нанося на изделие. Позднее материал ополаскивают. Также в борьбе с пятнами выступает мыло «Антипятин», требующее после своего применения, качественного полоскания.

Отзывы о стирке мембранных вещей, как правило, принадлежат молодым мамам. Малыши, любящие пробежаться по лужам или всю дорогу домой нести в руках камень, пачкают одежду очень быстро и сильно. Заботливые хозяйки не спешат стирать вещи в стиральной машине, прибегая к ручной стирке щетками, мылом, специальными бальзамами и эмульсиями. Машинкам же доверяют лишь процесс полоскания, ведь как утверждают многие, удалить пену из только что постиранной вещи – процесс трудоемкий и утомляющий. При некачественном ее удалении можно получить на выходе костюм в белоснежных разводах.

Тем не менее, другие мамы и молодые люди, находящие в спешке, решают вопрос очистки с помощью стиральной машины. Отзывы их весьма положительны, ведь при соблюдении всех правил, мембрана не теряет своих свойств. Стоит заметить, что стирают мембранную верхнюю одежду только отдельно от других вещей, сохраняя тем самым яркость и насыщенность первозданного рисунка.

Некоторые, впрочем, используют любые хорошие порошки, утверждая, что мембрана, используемая в одежде, которую можно купить на российском рынке, мембраной только именуется. Не существует в ней тех свойств водонепроницаемости, а потому и со стиркой мучиться не нужно. Возможно, это действительно так. Однако если в ваших руках оказалась добротная вещь зарубежного бренда, не стоит экспериментировать с ней, ведь наверняка стоимость ее в десятки раз выше, нежели любое средство для стирки мембраны.

В следующем видео смотрите все тонкости ухода за мембранной одеждой.

Средство для стирки мембранной одежды

Иногда стирка одежды может поставить вас перед выбором средства для стирки, особенно, если в вашем гардеробе появилась вещь из незнакомой ткани. Одной из таких тканей может стать мембрана. Из нее часто шьют спортивную одежду, вещи для туристов и детей. Этот материал обладает уникальными свойствами, а потому и средства, чтобы постирать этот материал, нужны специальные. Что это за средства, как их выбрать, и как стирать?

«Чудо» свойства ткани

Мембрана представляет собой особый слой внутри ткани, в виде сетки с мельчайшими порами. Мембрану с двух сторон покрывают специальной защитой. Верхний слой ткани с мембраной – это  износостойкий материал. Благодаря многослойности мембранная ткань имеет следующие свойства:

  • отталкивает воду, что позволяет не промокать под дождем;
  • хорошо «дышит», что означает, что в такой непромокаемой одежде не придется потеть, так как испарения легко проходят наружу;
  • ветронепродуваема, это делает ее комфортной для любой погоды;
  • легкая и сохраняет тепло, поэтому из мембранной ткани не делают утеплители, за исключением пуховиков и зимних курток, мембрана не пропускает холод вовнутрь.

К сведению! Мембранная ткань довольно дорогая, поэтому прежде чем использовать что-то для стирки, убедить, что средство подходит для такого типа одежды, ведь испортить дорогостоящую вещь более чем неприятно.

Требования к средствам

Какое же средство для стирки лучше выбрать, каким оно должно быть? Чтобы ответить на этот вопрос нужно исходить из свойств ткани, которые мы описали выше. Вот несколько требований к средству для стирки мембранной ткани:

  • оно не должно содержать хлор, так как хлор испортит водоотталкивающее свойство ткани;
  • оно не должно содержать большого количества энзимов, которые воспринимают пропитку ткани, как грязь, разрушая ее;
  • средство не должно содержать кислородный отбеливатель, так как он забивает поры мембраны, ткань перестает «дышать»;
  • в составе не должно быть крупных абразивных частиц.

Учитывая эти требования, с уверенностью можно сказать, что для стирки мембраны не подходит:

  1. любой порошок, Taid, Ariel, Persill и другие;
  2. обычные жидкие средства для стирки, в них содержаться энзимы;
  3. отбеливатели и пятновыводители;
  4. средства для стирки деликатной одежды, типа «Ласка», «Ворсинка» и т.п.;
  5. жидкое мыло.

Вывод: стирать одежду из мембраны можно только специальными средствами, предназначенными для определенного вида одежды.

Например, есть отдельные средства для спортивной одежды и для верхней одежды с утеплителем. Если такого средства под рукой не оказалось можно использовать хозяйственное мыло, не содержащее хлор. Но стирать им одежду постоянно не стоит, со временем ткань начнет терять свои «дышащие» свойства.

Краткий обзор

На рынке бытовой химии есть множество средств, чтобы постирать одежду из мембраны, от разных производителей, приведем несколько примеров.

  • Perwoll Sport & Active – жидкое средство, предназначенное для стирки спортивных вещей, с запахом свежести. Этим средством можно стирать комбинезоны, термобелье, спортивные костюмы и куртки, брюки из болоньевой ткани и эластика.
  • Tech Wash фирмы Nikwax – специальное биоразлагаемое жидкое мыло для мембраны, способствует сохранению водоотталкивающих свойств ткани. Также оно используется для стирки нейлоновых и хлопковых тканей, брезента, GoreTex, Dry Factor, Sympatex, Ultrex. Им стирают палатки, рюкзаки, альпинистские веревки. Данное средство продается в концентрированном виде, а потому подходит для выведения пятен.

  • Domal «Sport Fein Fashion» – немецкое средство. Тщательно очищает одежду от разных видов загрязнений, не влияя на свойства тканей. Одного флакона средства объемом 750 мл хватает на 25 кг сухого белья, что весьма экономично.
  • Denkmit Fresh Sensation – гелеобразное средство, подходящее для мембраны, справляющееся с загрязнениями и запахами. Однако он придает ткани водоотталкивающие свойства.

Как стирать и ухаживать

Самый бережный способ стирки мембраны – ручной. Необходимо намочить изделие в чуть теплой воде, а затем нанести одно из специальных средств, а после смыть его под струей воды. Не выкручивайте изделие, пусть вода сама стечет с вещи. Этот способ понравится немногим, так как ни время, ни сил на ручной труд  при наличии машины автомат тратить не хочется.

Чтобы постирать одежду из мембраны в машине, нужно соблюдать правила:

  • стирать в одном из режимов: «ручная стирка», «шерсть», «спортивная одежда»;
  • отрегулировать температуру на 300;
  • отключить отжим;
  • не использовать режим замачивания или предварительной стирки, а также режим сушки в машине;
  • стирать крупные изделия в отдельности.

После стирки в машине изделие раскладывают на горизонтальной поверхности и в таком виде сушат в хорошо проветриваемом помещении. Нельзя сушить мембрану у огня или батареи, а также гладить утюгом. При необходимости после сушки мембранную одежду пропитывают специальным водоотталкивающим составом. Это продлит срок службы изделий. Если вы заметили, что одежда в некоторых местах стала промокать, то эта процедура просто необходима.

Для пропитки можно использовать средство Down Proof фирмы Nikwax. Защитное средство в виде спрея наносят на поверхность одежды и ждут полного высыхания. Жидкую пропитку необходимо применять во время полоскания изделий. Данную процедуру необходимо делать через одну-пару стирок, частая пропитка приведет к забиванию мембраны, она утратит другие свои свойства.

Важно! Водоотталкивающие пропитки нужно использовать только после стирки одежды и строго в соответствие с инструкцией.

Итак, стирать мембранную одежду несложно, ведь с появлением нового материала появились и средства по уходу за ними. Покупайте средства от проверенных производителей и стирайте согласно рекомендациям на этикетке. И тогда ваша одежда всегда будет в отличном состоянии.

  • Поделитесь своим мнением - оставьте комментарий

Чем и как стирать одежду из мембранной ткани - стирка и уход за вещами в стиральной машине, можно ли ухаживать обычным порошком

Жители нашей страны погодой не избалованы и большую часть года вынуждены одеваться теплее перед выходом из дома. Здесь закон простой, чем ниже температура за окном, тем больше свитеров и штанов на себе носишь. Но к счастью, прогресс не стоит на месте. Теперь, чтобы не замерзнуть в холодное время года можно и не заворачиваться в тысячу одежек, становясь похожим на капусту. Для всех любителей зимних забав создаются специальные материалы, устойчивые к плохим погодным условиям. Одной из таких новинок, успевшей полюбиться спортсменам, альпинистам, рыболовам, да и просто любителям долгих прогулок, являются костюмы, куртки и комбинезоны из мембраны. Ее достоинства впечатляют: она дышит, защищает от ветра и влаги, выводит лишнюю влагу наружу, не позволяя потеть, защищает от перегрева. Стоимость такого ноу-хау на сегодняшний день довольно высокая, но отзывы о качествах и свойствах не оставляют сомнений – оно того стоит! Просто не забывайте, этот материал требует особого ухода. Как ухаживать за одеждой из мембранной ткани мы еще поговорим. Но начнем разбираться по порядку и выясним, откуда берутся чудесные особенности современных материалов.

Что такое мембранная ткань?


Сама по себе она представляет соединение материала-основы и пористой поверхности. Последняя, несмотря на то что является лишь тоненькой пленкой с микроскопическими порами, способна удерживать воду с внешней стороны. При этом поры пропускают влагу изнутри, а кожа может свободно дышать.

Благодаря новейшей технологии ткань получается невесомой, но прочной. Она не пропускает внутрь влагу и воздух, поэтому ни дождь, ни ветер не доберутся до вас. Куртка будет сохранять тепло даже без дополнительных утеплителей. При этом, поры остаются дышащими – вы не вспотеете в ней.

По строению мембраны делят на три вида:

  1. Двухслойные – тонкая ткань на которую нанесли пористое полотно. Всегда эксплуатируется только вместе с подкладкой, защищающей поры от загрязнения и повреждений.
  2. Трехслойные – похожи на двухслойную, но со стороны защищена трикотажной сеткой.
  3. Двухсполовинные – самый новый вид. Здесь мембрану защищает специальный пупырчатый слой. Материя получается очень легкая, потому что не нуждается в дополнительной подкладке.
Волшебный дышащий материал полюбился взрослым и детям, и хорош как для профессиональных занятий спортом (например, альпинизм), так и для долгих прогулок и путешествий.

Есть еще одна немаловажная особенность – носить костюм или куртку необходимо в комплекте с вещами похожего назначения. Это могут кофты на флисе или термобелье. Тогда тело будет свободно выводить влагу.

Не забывайте – сама по себе мембрана не греет. Она не пропустит холодный воздух вам под куртку, но тело должно греть себя само, поэтому новинка в первую очередь подходит тому, кто привык к активному отдыху.

Но все же есть у этого изобретения и свои недостатки. Здесь, конечно, стоит отметить и ее дороговизну, а также сравнительную недолговечность. К недостаткам можно отнести и то, что такая ткань нуждается в особенном уходе и защите, о котором нельзя забывать, чтобы продлить жизнь вещей.

Как стирать мембранную одежду:

До сих пор многие сомневаются, можно ли вообще ее стирать? Интернет кричит о том, что такое одеяние стирать категорически запрещено. Но как же быть? Загрязнения могут появиться даже у самых аккуратных пользователей. Что же делать в таком случае? Не выбрасывать же из-за этого дорогостоящий костюм. Конечно, нет. Очистить его можно. Просто действовать вам придется очень осторожно.

Но не стоит затевать стирку очень часто, потому что чистка будет стрессом для этого вида ткани. Если появились пятна, попробуйте для начала удалить его с помощью тряпки или щетки.

Будьте внимательны! Не все вещи из мембраны можно стирать в машине. Вам необходимо тщательно изучить ярлычки, если не найдете на них разрешения на машинный уход, лучше не рискуйте и стирайте на руках.

Сомневаетесь можно ли стирать мембранную одежду обычным порошком, правильно делаете. Использовать такие средства запрещено. При стирке вещей гранулы просто забьют поры на материи и нарушат их проницаемость.

Вот еще несколько важных правил:

- не замачивайте костюмы перед стиркой на длительное время;

- не используйте кондиционеры, мембрана их не любит;

- не используется вещества с хлором – никаких пятновыводителей или растворителей, разрушающих пористую поверхность;

- соблюдайте температурный режим, который должен быть не выше 40 градусов;

- отжимать следует только вручную, а сушить в закрытом помещении. Солнце и ветер способны нанести капризной материи непоправимый урон;

- перед процедурой выверните рукава на изнаночную сторону и застегните все молнии.

В стиральной машинке:

Прежде чем отправлять такие изделия в стиральную машину, нужно выбрать подходящее вещество. В продаже можно найти специальные жидкие очистители для этих вещей, которые помогут удалить загрязнения, не испортив ткань. В линейке профессиональных средств для очистки можно назвать Nikwax Tech Wash, DOMAL Sport Fein Fashion, DM Fresh Sensation – они способны не только избавить от грязных пятен, но сохранить защитные свойства мембраны.

Если по какой-то причине профессиональные средства вам недоступны, разрешается использование гелей для душа, для мытья посуды. Но самым доступным приспособлением для чистки является обыкновенное мыло – хозяйственное или детское. Чтобы оно лучше растворялось в воде, перед стиркой просто натрите его на обычной терке.

Добавляйте средство для стирки не только в специальный отсек, но и прямо с бельем.

Не забывайте, при какой температуре стирать мембранную одежду – не более 40 градусов. Нарушение температурного режима повредит ткань.

Не набивайте стиральную машину другими вещицами, пусть куртка и брюки стираются отдельно. Используйте только бережные режимы.

Руками:

А также есть несколько секретов, как стирать вещи из этого вида ткани вручную.

В первую очередь ни в коем случае нельзя грубо тереть пятна – вы навредите мембране и испортите ее.

Приступайте к стирке поэтапно:

  1. Положите вещь в таз, добавьте воды;
  2. Затем добавляем средство, которое будем использовать;
  3. Бережно опускаем и прополаскиваем в мыльной воде. Нельзя мылить отдельно;
  4. Для особо стойких загрязнений используйте мыльную пену. Можно взять мягкую щетку, но будьте очень аккуратны;
  5. После этого несколько раз вещь нужно прополоскать в теплой воде. Это важно, потому что необходимо освободить поры мембраны от мыла, иначе она не сможет дышать.

Как ухаживать за мембранной одеждой?

После стирки также необходим специальный уход за мембранной тканью.

Сушить:

Правильная сушка важная не менее чем, соблюдение всех правил при стирке. Использование сушилки в стиральной машине или излишнее воздействие на материал способны навсегда испортить ее свойства. Чтобы этого не случилось, рекомендуется для этого взять банное полотенце, в которое необходимо завернуть куртку. После того как влага впитается, положите вещь на ровной горизонтальной поверхности, избегая заломов на ткани. Оставить сохнуть вещь в закрытом помещении, которое хорошо проветривается. Следите за тем, чтобы сюда не попадали прямые солнечные лучи, и место сушки было подальше от батареи – перегрев испортит не только свойства ткани, но и ее внешний вид.

Гладить:

Гладить запрещено, потому что высокие температуры убивают все волшебные свойства дышащей ткани.

Уход за мембранной одеждой после стирки состоит в том, чтобы обработать ее специальными средствами, которые продлят срок службы. Они также способны поддерживать водоотталкивающие свойства, спасать от прямых солнечных лучей и даже некоторое время будет защищать от внешних загрязнений. Не используйте эти защитные средства на грязной или влажной поверхности.

Бережно храните вещи в вертикальном положении, не допускайте, чтобы ткань смялась. Избегайте попадания пыли, для этого можно использовать специальные чехлы для хранения белья.


На самом деле уход за вещами из современных материалов несложен, достаточно соблюдать несколько простых правил, и она будет радовать вас не один сезон.

Как стирать мембранную одежду в стиральной машине: средства

Мембранная ткань отличается высоким водоотталкивающим и грязеотталкивающим эффектом и прекрасно сохраняет тепло.

Одежда из такой ткани легкая, теплая и очень практичная. За счет чего мембрана обладает такими свойствами?

Структура мембранной ткани

Ткань сохраняет тепло за счет уникальной текстуры материала, если посмотреть через лупу можно увидеть мелкие ячейки, которые, при повышении температуры, выпускают теплый воздух, а холодный воздух, наоборот, не пропускают. Получается своеобразный микроклимат для поддержания комфортной температуры человека. Сверху мембрана покрыта невидимой  пленкой и обработана специальным водоотталкивающим средством. Все это позволяет ткани оставаться сухой изнутри.

Тонкости при стирке мембраны

Не мудрено, что изделиям из такой ткани требуется особый уход.

Если загрязнения довольно сильные, грязь еще не высохла, дайте ей подсохнуть и очистите мягкой губкой.

Теперь можно приступить непосредственно к стирке, обычным порошком стирать нельзя, он забьет все «поры» и ткань потеряет свои замечательные свойства.

 Кроме обычного порошка, при стирке мембранной ткани нельзя использовать кондиционер, отбеливатель, хлорсодержащие вещества и другие агрессивные средства.

Поэтому, используем только специальное средство для стирки мембранной одежды, как правило оно жидкое.

В инструкции к средству указано, что можно использовать его и в стиральной машине, но, чтобы сохранить изделие надолго, рекомендуем стирать вручную.

Итак, берем нужное количество средства и действуем по инструкции. Не забудьте надеть перчатки.

Воду, не превышающую 40 градусов, в небольшом количестве наливаем в таз, выливаем туда средство для стирки мембраны, перемешиваем и погружаем в раствор наше изделие. Даем ткани намокнуть, и приступаем к стирке.

 Ни в коем случае не трем, стираем только мнущими движениями.

После чего, тщательно полощем в холодной воде (более трех раз), и без выжимания, вывешиваем стекать над ванной.

Сушить изделие желательно на плоской поверхности, тщательно расправив все складки. В комнате должно быть свежо и прохладно, недопустимо попадание солнечных лучей на одежду. Нельзя сушить на батареях или других отопительных приборах.

После каждой стирки обязательно на мембрану наносится пропитка. Когда изделие высохло, наносим специальный спрей  на чистую и сухую ткань. Затем не смывая, даем впитаться и через два – три часа смело эксплуатируем.

Данная процедура необходима потому, что при стирке старая пропитка смывается.

Если вновь не обработать ткань, она не будет защищать вас так эффективно, как до стирки. Это средство можно купить в любых специализированных магазинах или через интернет. Некоторые поставщики продают средство для стирки и пропитку на разлив. Это удобно, если бюджет ограничен, но экономнее, конечно, купить целую бутылку.

Хозяйственное или детское мыло

Кроме специальных средств для стирки мембранной одежды  можно использовать обычное хозяйственное или детское мыло. Действуем по следующему алгоритму:

  • растворяем мыло в воде;
  • погружаем одежду в мыльный раствор;
  • мягкой губкой протираем в загрязненных местах, без нажима;
  • полоскаем и даем стечь воде над ванной, без отжима.

Стирка мембраны в машине автомат

 Большинство изделий из мембраны стирать в машине нельзя, но есть одежда из плотной ткани и данный вид ухода возможен.

Эта информация отражена на бирке, изучите ее внимательно. Если вы приняли решение стирать в машине, учтите такие моменты, как:

При сильных загрязнениях стиральная машина может не справится и изделие нужно будет повторно стирать в ручную.

Какие средства для стирки мембранной одежды можно купить

Вот несколько производителей средств по уходу за мембраной:

  • Если вы ранее постирали изделие обычном порошком жидкость Nikwax Tech Wash спасет вас. Она промоет ячейки ткани и они снова «заработают». Кроме того, средство не только прекрасно очистит ткань от загрязнений, но и пропитает ее.

  • Бальзам DOMAL Sport Fein Fashion тоже неплохо справится с загрязнениями на любой спортивной одежде.

Кроме того, его можно использовать для тканей из полиэстера.

  • Гель Denkmit Fresh Sensation прекрасно отстирывает, но не содержит водоотталкивающей пропитки.

Цена значительно ниже, чем у других средств.

  • Perwoll — отличное средство для стирки мембранной спортивной одежды и даже для стирки обуви.

  • Капсула Ariel тоже эффективно отстирает мембрану, но конечно, она не содержит в себе пропитки.

При хорошем полоскании, производитель гарантирует отсутствие мыльных разводов на одежде.

Уход  и носка одежды из мембраны

Есть еще некоторые рекомендации по уходу за изделиями из мембраны:

  • одежду ни в коем случае нельзя гладить, ячейки слипнутся и вещь можно выбросить;
  • изделие нужно регулярно обрабатывать водоотталкивающими спреями;
  • чтобы предохранить одежду от пыли, храните ее в специальных тканевых или полиэтиленовых мешках в расправленном состоянии.

При носке одежды из мембраны, также существуют некоторые хитрости.

Например, под куртку или комбинезон нужно надевать термобелье и джемпер из специальных материалов (Outlast, Polartec, Windbloc).

Если вы наденете шерстяной свитер или футболку из трикотажа, то при интенсивных нагрузках, организм вспотеет. Мембрана не сможет вывести излишнюю влагу.

Мембранная одежда при правильной носке очень удобна, она легкая, что очень важно для малышей, которым нужно быстро двигаться. Это невозможно в тяжелых ватных и толстых синтепоновых куртках и комбинезонах.  Мембрана не даст промокнуть под дождем, при этом она будет «дышать», испарения будут выходить наружу. Сильного ветра тоже не стоит бояться, мембрана не продувается, когда дует ветер ячейки закрываются и вы чувствуете себя тепло и комфортно.

Конечно вещи из мембраны стоят не дешево, но при правильном уходе они прослужат вам много лет.



ТОП магазинов стиральных машин и бытовой техники:
  • mvideo.ru/- магазин бытовой техники, большой каталог стиральных машин
  •  holodilnik.ru – Недорогой магазин бытовой техники.
  • techport.ru - выгодный современный интернет магазин бытовой техники
  • citilink.ru - современный интернет магазин бытовой техники и электроники, дешевле офлайн магазинов!
  • ru.aliexpress.com- запчасти для стиральных машин

#уходзамембраной Instagram posts (photos and videos)

Мембранная одежда обладает неоспоримыми преимуществами, особенно это ценно в сложных погодных условиях ⛈. Все райдеры, выбирая костюм для катания, в первую очередь, думают о показателях мембранной ткани, конечно, чем выше эти значения 👍, тем большую защиту обеспечивает одежда от непогоды. Но многие забывают, что первый защитный слой от осадков 💧 - это водоотталкивающая пропитка внешнего материала. И как ни странно, она обеспечивает до 90% защиты от мокрого снега и дождя, не давая влаге дойти до мембранной ткани. Все профессиональные костюмы для катания 🏂 имеют DWR-покрытие, которое было нанесено на ткань заводом-производителем. Но данное покрытие не так долговечно, как может показаться на первый взгляд. Постепенно оно вымывается из ткани во время стирки и вследствие механических воздействий на одежду во время ношения рюкзака или сидения на подъемнике. Но данное покрытие можно восстановить! Для этого вам понадобятся средства по уходу за мембранной одеждой. Их основные задачи: • очистить костюм от внешних и внутренних загрязнений; • регенерировать первоначальные свойства мембранной ткани; • восстановить и обновить водоотталкивающий слой. Специальные средства для стирки максимально бережно относятся к спортивной одежде, чтобы не повредить микропористую структуру мембранной ткани. Не стоит для чистки костюма использовать обычные кондиционеры, пятновыводители или отбеливатели. Если на вашей одежде есть локальные сильные загрязнения, мы рекомендуем их замыть губкой 🧽 с чистящим средством, а потом постирать костюм специальным составом. Так вы избавитесь от грязи, но ваше воздействие на пропитку и мембранную ткань будет локальным. И не забывайте, чем моющее средство агрессивней по отношению к загрязнениям, тем оно и сильней воздействует на мембрану и пропитку вашей высокотехнологичной одежды!

Чем постирать одежду из мембраны в стиральной машинке, основные правила стирки

Современные технологии производства зимней одежды позволяют создавать теплые, невесомые и невероятно удобные куртки, брюки и комбинезоны, которые подходят для занятий спортом и для повседневного ношения. Отказ от натурального меха в пользу синтетических материалов не только является экологичным решением, но и значительно упрощает уход за изделиями. Одним из наиболее интересных материалов является мембранная прослойка. Свойства этой ткани отлично сохраняют тепло, одновременно позволяя коже дышать и отводя лишнюю влагу. Поскольку многие зимние пуховики теперь имеют такой дополнительный слой, будет полезно знать, как и чем стирать мембранную одежду в стиральной машине и какие правила ухода необходимо соблюдать для сохранения полезных эксплуатационных качеств материала.

Подходит ли для стирки обычный порошок

Многие хозяйки без раздумий стирают мембранную одежду стиральным порошком, считая его универсальным средством для всех типов тканей. Эта ошибка не испортит внешнего вида зимней куртки, но мембрана утратит уникальные свойства и «дышащий» пуховик станет напоминать прорезиненную накидку. Человеку в нем будет некомфортно из-за повышенного потоотделения. Необходимо понимать особенность ткани, чтобы решить, можно ли стирать мембрану обычным порошком. Дело в том, что мелкие частички порошкообразного средства, крупинки или гранулы, забивают мелкие поры мембранной ткани. В результате нарушается воздухообмен между внутренним и поверхностным слоями.

Чтобы избежать закупоривания, необходимо пользоваться жидкими средствами, предназначенными для стирки синтетики или специальные составы для ухода за спортивной одеждой.

На заметку! Производители качественной мембранной одежды выпускают серии средств по уходу, предназначенные для стирки, пропитки и удаления сложных пятен. Эти составы не испортят структуру мембраны и облегчат задачу по поддержанию внешнего вида и уникальных свойств вещи.

Допускается ли использование хозяйственного мыла

Одним из самых доступных средств для стирки такого типа одежды является обычное хозяйственное мыло. Отличная растворимость в воде, хорошие моющие свойства, нейтральный запах делают его незаменимым помощником. Современные производители выпускают хозяйственное мыло в жидком виде, а также в известной всем кусковой форме. Средство подходит как для использования в стиральной машине, так и ручной обработки. При стирке хозяйственным мылом лучше использовать жидкий раствор или приготовить стружку, натерев кусок на терке.

На заметку! Приготовленную стружку добавляют непосредственно в барабан стиральной машины, а для полного удаления остатков средства из ткани ставят режим дополнительного полоскания.

Какое средство выбрать для стирки в стиральной машине

Зимний костюм или комбинезон с мембраной стирать вручную сложнее, чем куртку, поэтому объемные изделия лучше подвергнуть машинной обработке. Эффективность и безопасность стирки зависит от выбора моющего состава. Следует учитывать, что не все средства, подходящие для ручного метода, могут быть использованы в стиральной машинке.

Лучшие составы, предназначенные для ухода за одеждой:

  • DOMAL. Фирма производит специальный продукт Sport Fein Fashion, который подходит для стирки курток, костюмов, комбинезонов с мембранной прослойкой. Средство содержит увлажняющий бальзам, придающий вещам мягкость. После просушивания зимнюю одежду рекомендуется обработать влагозащитной пропиткой этой же фирмы для предотвращения промокания.
  • Nikwax Tech Wash. Это средство подходит для стирки мембранных пуховиков, брюк, курток в стиральной машине и ручным методом. Помимо отличных отстирывающих свойств, состав помогает удалить из пор мембраны остатки порошка, который ранее использовали для ухода. Не требует использования пропитки после просушивания вещей, поскольку создает на поверхности водоотталкивающий слой.

    Denkmit Fresh Sensation

  • Denkmit Fresh Sensation. Бюджетное средство в виде геля по уходу за спортивной и мембранной одеждой, рекомендованное для стирки в машинке или вручную. Дополнительно необходимо использовать пропитывающий спрей, поскольку гель не обладает защитными свойствами.
  • Perwoll. Серия средств представлена гелями для стирки всех видов спортивной одежды, в том числе с мембранным слоем. Обладает хорошими моющими свойствами, избавляет от запаха пота, придает вещам приятный аромат и эффективно борется с жировыми отложениями на поверхности ткани.
  • Хозяйственное мыло. Мыльную стружку, натертую на терке, или жидкое средство добавляют сразу в барабан стиральной машины вместе с одеждой. Великолепно отстирывает, легко выполаскивается и не портит вещи с мембраной.

На заметку! Если ни одного из представленных выше средств под рукой нет, а постирать одежду нужно срочно, то можно воспользоваться обычным шампунем для волос. Бонусом будет приятный аромат и мягкость ткани.

Как правильно постирать в стиральной машине

Особенность стирки курток, костюмов, комбинезонов или брюк в стиральной машине заключается в необходимости выбора нужного режима основного цикла, подбора температуры, количества оборотов отжима и полоскания.

Места сильного загрязнения очищаются при помощи мягкой щетки

Как правильно стирать мембранную одежду:

  • Области сильных загрязнений застирывают отдельно, используя мягкую щеточку или влажную ткань с нанесенным моющим составом.
  • Программа ухода за мембранной одеждой соответствует режиму для деликатных тканей или ручной стирки.
  • Температура воды обычно устанавливается автоматически при выборе одной из установок, но следует проверить, чтобы она не превышала значения 30-40 градусов.
  • Обязательно нужно добавить от 2 до трех циклов дополнительного полоскания, чтобы полностью удалить остатки моющего средства из пор мембраны.
  • Автоматический отжим лучше отключить совсем, но если одежду нужно просушить быстро, то разрешается установить параметры 200-300 оборотов в минуту.

После стирки в машинке вещи сушат горизонтально при комнатной температуре, а обработку влагозащитными пропитками производят при полном высыхании.

Рекомендуем:

Как постирать одеяло

Важно! Перед стиркой в автоматической машинке нужно застегнуть все молнии, карманы, клепки и застежки куртки, чтобы исключить риск повреждения ткани металлическими деталями.

Как часто нужно стирать вещи с мембраной

Первоначальное предназначение мембранной одежды – активный образ жизни и занятия спортом. Ткань полностью синтетическая, и поэтому требует особого режима ухода. В процессе активной спортивной деятельности человек теряет много жидкости с потом, который имеет специфический неприятный запах. Эти выделения впитываются мембраной и забивают поры технологического материала. Верхнее покрытие одежды при активной эксплуатации также быстро пачкается, при этом на воротнике, карманах, рукавах часто остаются сложные жировые загрязнения. Чтобы поддерживать одежду в хорошем состоянии и своевременно очищать поры прослойки, необходимо часто стирать вещи.


При активном режиме повседневного ношения рекомендованная частота стирки составляет один раз в 10-14 дней. Если мембранная одежда используется в качестве атрибута для занятий спортом на свежем воздухе, то стирать куртки и комбинезоны следует по мере загрязнения.

Тонкости ручной стирки

Постирать вещи с мембраной вручную несложно. Даже пуховики и зимние комбинезоны с «дышащей» прослойкой отличаются небольшим весом и при намокании впитывают малое количество воды. Обычно на этикетке указаны рекомендованные параметры стирки, сушки и хранения, поэтому при покупке следует обратить внимание на наличие данных инструкций.

Как стирать мембрану ручным методом:

  • Осмотреть одежду на наличие сложных пятен и сильных загрязнений. При необходимости оттереть грязь губкой, смоченной в моющем растворе.
  • Перед замачиванием следует застегнуть все молнии и кнопки, а одежду вывернуть наизнанку.
  • Приготовить теплую воду, развести в ней жидкое средство для стирки мембранных изделий и погрузить в раствор куртку.
  • Мягкими движениями равномерно распределить состав по всему материалу.
  • После отстирывания вручную важно тщательно прополоскать изделие, чтобы полностью удалить остатки моющего средства.

Сушат пуховики, куртки, брюки и другие изделия с мембранной прослойкой горизонтальным методом, разложив на махровом полотенце, а чуть влажную вещь можно повесить на плечики в хорошо вентилируемом помещении.

Уход за мембранной одеждой не представляет сложности, если выбрать правильное моющее средство и соблюдать рекомендации производителя. Составы для стирки можно приобрести в отделе бытовой химии или в магазине спортивных товаров. Чтобы сохранить качества материала, не следует превышать рекомендованную концентрацию раствора и нельзя использовать обычный порошок.

Техника, теория и устранение неполадок

Вестерн-блоттинг часто используется в исследованиях для разделения и идентификации белков. В этом методе смесь белков разделяется по молекулярной массе и, следовательно, по типу с помощью гель-электрофореза. Затем эти результаты переносятся на мембрану, образуя полосу для каждого белка. Затем мембрану инкубируют с метками антител, специфичных к интересующему белку.

Несвязавшееся антитело смывается, оставляя только связанное антитело к интересующему белку.Связанные антитела затем обнаруживаются проявлением пленки. Поскольку антитела связываются только с интересующим белком, должна быть видна только одна полоса. Толщина полосы соответствует количеству присутствующего белка; таким образом, стандарт может указывать на количество присутствующего белка. В документе сначала будет описан протокол вестерн-блоттинга с изображениями, которые помогут читателю и теории рационализировать протокол. За этим последует теоретическое объяснение процедуры, а в следующем разделе - советы по поиску и устранению распространенных проблем.

Теория

Подготовка образца

Лизаты клеток являются наиболее распространенной формой образцов, используемых для вестерн-блоттинга. Экстракция белка пытается собрать все белки в цитозоле клетки. Это следует делать при низкой температуре с ингибиторами протеаз, чтобы предотвратить денатурацию белков. Поскольку образец ткани демонстрирует более высокую степень структуры, для извлечения белков необходимо механическое изобретение, такое как гомогенизация или обработка ультразвуком.

После экстракции белка очень важно иметь хорошее представление о концентрации экстракта.В конечном итоге это позволяет исследователю гарантировать, что образцы сравниваются на эквивалентной основе. Концентрацию белка часто измеряют с помощью спектрофотометра. Использование этой концентрации позволяет измерить массу белка, загружаемого в каждую лунку, по соотношению между концентрацией, массой и объемом.

После определения подходящего объема образца его разбавляют загрузочным буфером, который содержит глицерин, так что образцы легко погружаются в лунки геля.Следящий краситель (бромфеноловый синий) также присутствует в буфере, что позволяет исследователю увидеть, насколько далеко продвинулось разделение. Образец нагревают после разбавления в загрузочном буфере, чтобы денатурировать структуру более высокого порядка, сохраняя при этом сульфидные мостики. Денатурация высокой структуры гарантирует, что отрицательный заряд аминокислот не нейтрализуется, позволяя белку перемещаться в электрическом поле (применяемом во время электропереноса).

Также очень важно иметь положительный и отрицательный контроли для образца.Для положительного контроля используется известный источник целевого белка, такой как очищенный белок или контрольный лизат. Это помогает подтвердить идентичность белка и активность антитела. Отрицательный контроль представляет собой нулевую клеточную линию, такую ​​как β-актин, также используется для подтверждения того, что окрашивание не является неспецифическим.

Гель-электрофорез

Вестерн-блот использует два разных типа агарозного геля: складывающий и разделяющий гель. Гель с более высоким слоем имеет слабокислый (pH 6,8) и имеет более низкую концентрацию акриламида, образуя пористый гель, который плохо отделяет белок, но позволяет им образовывать тонкие, четко очерченные полосы.Нижний гель, называемый разделяющим или разделяющим гелем, является основным (pH 8,8) и имеет более высокое содержание полиакриламида, что сужает поры геля. Таким образом, в этом геле белки разделены по размеру больше, так как более мелкие белки перемещаются легче и, следовательно, быстрее, чем более крупные белки.

Белки при загрузке на гель имеют отрицательный заряд, поскольку они денатурированы при нагревании, и будут перемещаться к положительному электроду при приложении напряжения. Гели обычно получают путем заливки их между двумя стеклянными или пластиковыми пластинами с использованием раствора, описанного в разделе протокола.Образцы и маркер загружаются в лунки, а пустые лунки загружаются буфером для образцов. Затем гель подключают к источнику питания и дают ему растечься. Напряжение очень важно, так как высокое напряжение может перегреть и исказить полосы.

Блоттинг

После разделения белковой смеси ее переносят на мембрану. Перенос осуществляется с помощью электрического поля, ориентированного перпендикулярно поверхности геля, в результате чего белки перемещаются из геля на мембрану.Мембрана помещается между поверхностью геля и положительным электродом в виде сэндвича. Сэндвич включает волокнистую прокладку (губку) на каждом конце и фильтровальную бумагу для защиты геля и промокательную мембрану []. Здесь очень важны две вещи: (1) тесный контакт геля и мембраны для обеспечения четкого изображения и (2) размещение мембраны между гелем и положительным электродом. Мембрана должна быть размещена как таковая, чтобы отрицательно заряженные белки могли мигрировать из геля на мембрану.Этот тип переноса называется электрофоретическим переносом и может выполняться в полусухих или влажных условиях. Влажные условия обычно более надежны, поскольку меньше вероятность высыхания геля, и они предпочтительны для более крупных белков.

Сборка сэндвича в вестерн-блоте

Мембрана, твердая подложка, является неотъемлемой частью этого процесса. Есть два типа мембран: нитроцеллюлоза и ПВДФ. Нитроцеллюлоза используется из-за ее высокого сродства к белку и способности удерживать.Однако он хрупкий и не позволяет использовать мембрану для повторного зондирования. В этом отношении мембраны из ПВДФ обеспечивают лучшую механическую поддержку и позволяют повторно зондировать и хранить блот. Однако фон PVDF-мембран выше, поэтому тщательная промывка очень важна.

Промывание, блокирование и инкубация антител

Блокирование - очень важный этап вестерн-блоттинга, поскольку он предотвращает неспецифическое связывание антител с мембраной. Блокировка часто производится с помощью 5% BSA или обезжиренного сухого молока, разбавленного TBST для уменьшения фона.

Часто предпочитают обезжиренное сухое молоко, поскольку оно недорогое и широко доступно. Однако молочные белки совместимы не со всеми метками для обнаружения, поэтому следует внимательно выбирать подходящий блокирующий раствор. Например, растворы, блокирующие БСА, предпочтительны с метками биотина и АР-антител и антифосфопротеиновых антител, поскольку молоко содержит казеин, который сам по себе является фосфопротеином и биотином, что мешает результатам анализа. Часто хорошая стратегия - инкубировать первичное антитело с BSA, поскольку его обычно требуется в более высоких количествах, чем вторичное антитело.Помещение его в раствор BSA позволяет повторно использовать антитело, если блот не дает хорошего результата.

Концентрация антитела зависит от инструкции производителя. Антитело можно развести в промывочном буфере, таком как PBS или TBST. Промывание очень важно, поскольку оно сводит к минимуму фон и удаляет несвязанные антитела. Однако мембрану не следует оставлять для мытья очень долго, так как это также может уменьшить сигнал.

Затем мембрану выявляют с помощью антитела-метки, обычно с помощью фермента, такого как пероксидаза хрена (HRP), который обнаруживается по сигналу, который он производит, в соответствии с положением целевого белка.Этот сигнал фиксируется на пленке, которая обычно проявляется в темной комнате.

Количественная оценка

Очень важно знать, что данные, полученные с помощью вестерн-блоттинга, обычно считаются полуколичественными. Это потому, что он обеспечивает относительное сравнение уровней белка, но не абсолютную меру количества. Для этого есть две причины; Во-первых, существуют различия в загрузке и скорости переноса между образцами на отдельных дорожках, которые различаются для разных блотов.Эти различия необходимо будет стандартизировать, прежде чем можно будет провести более точное сравнение. Во-вторых, сигнал, генерируемый детектированием, не является линейным в диапазоне концентраций образцов. Таким образом, поскольку создаваемый сигнал не является линейным, его не следует использовать для моделирования концентрации.

Устранение неполадок

Несмотря на то, что процедура вестерн-блоттинга проста, может возникнуть множество проблем, приводящих к неожиданным результатам. Проблему можно разделить на пять категорий: (1) необычные или неожиданные полосы, (2) отсутствие полос, (3) слабые полосы или слабый сигнал, (4) высокий фон на пятне и (5) неоднородные или неравномерные пятна на пятнах. пятно.

Необычные или неожиданные полосы могут быть следствием деградации протеазой, которая приводит к образованию полос в неожиданных положениях. В этом случае рекомендуется использовать свежий образец, который хранился на льду, или изменить антитело. Если кажется, что белок находится в слишком высоком положении, повторный нагрев образца может помочь разрушить четвертичную структуру белка. Точно так же размытые полосы часто возникают из-за высокого напряжения или пузырьков воздуха, присутствующих во время переноса. В этом случае необходимо убедиться, что гель работает при более низком напряжении и что сэндвич для переноса подготовлен должным образом.Кроме того, решить проблему может также изменение рабочего буфера. Плоские полосы могут быть результатом слишком быстрого прохождения геля из-за низкого сопротивления. Чтобы исправить это, гель следует оптимизировать, чтобы он соответствовал образцу. Наконец, белые (отрицательные) полосы на пленке вызваны слишком большим количеством белка или антител.

Другая проблема: полосы также не могут возникнуть по многим причинам, связанным с используемыми антителами, антигенами или буфером. Если используется неподходящее антитело, первичное или вторичное, полоса не будет видна.Кроме того, концентрация антитела также должна быть подходящей; если концентрация слишком низкая, сигнал может быть не виден. Важно помнить, что некоторые антитела нельзя использовать для вестерн-блоттинга. Другой причиной отсутствия видимых полос является самая низкая концентрация или отсутствие антигена. В этом случае можно использовать антиген из другого источника, чтобы подтвердить, связана ли проблема с образцом или с другими элементами, такими как антитело. Более того, длительная стирка также может уменьшить сигнал.Буферы также могут способствовать возникновению проблемы. Следует убедиться, что все буферы, такие как буфер передачи, TBST, рабочий буфер и ECL, новые и незагрязненные. Если буферы загрязнены азидом натрия, он может инактивировать HRP.

Точно так же слабые сигналы могут быть вызваны низкой концентрацией антитела или антигена. Увеличение времени экспозиции также может помочь сделать полоску более четкой. Другой причиной может быть обезжиренное сухое молоко, маскирующее антиген. В этом случае используйте BSA или уменьшите количество используемого молока.

Высокий фон часто вызван слишком высокой концентрацией антител, которые могут связываться с мембранами PVDF. Другой проблемой могут быть буферы, которые могут быть слишком старыми. Увеличение времени стирки также может помочь уменьшить фон. Кроме того, к этой проблеме может привести слишком высокая экспозиция. Поэтому рекомендуется проверять разное время выдержки для достижения оптимального времени.

Пятнистые и неровные пятна на пятне обычно возникают из-за неправильного переноса. Если между гелем и мембраной остались пузырьки воздуха, на пленке он станет темнее.Также важно использовать шейкер для всей инкубации, чтобы не было неравномерного перемешивания во время инкубации. И снова мытье имеет первостепенное значение для размытия фона. Эта проблема также может быть вызвана связыванием антител с блокирующими агентами; в этом случае следует попробовать другой блокирующий агент. Фильтрация блокирующего агента также может помочь удалить некоторые загрязнения. Наконец, эта проблема также может быть вызвана агрегацией вторичного антитела; в этом случае вторичное антитело следует центрифугировать и профильтровать для удаления агрегатов.

Рекомендации по уходу за мембранной верхней одеждой

Рекомендации по уходу за мембранной верхней одеждой

Любой предмет одежды, даже самый простой в уходе, может ухудшиться и потерять свои прекрасные и уникальные качества. В результате длительного использования одежда может запачкаться, потерять воздухопроницаемость, теплопроводность и внешний вид. Правильный уход помогает продлить срок службы любой одежды.

Как и любая одежда, верхняя одежда из мембраны требует соответствующего ухода.Мембранная верхняя одежда стоит дорого, поэтому очень важно максимально продлить срок ее службы. Здесь может пригодиться знание основ правильного ухода за верхней одеждой из мембран.

Стирка мембранной одежды

Не рекомендуется стирать мембранную одежду обычными моющими средствами. Типичный стиральный порошок блокирует ячеистую структуру мембраны, что приводит к потере ее специфических качеств. В этом случае мембрана перестает «дышать» - снижается ее воздухопроницаемость.То же самое происходит при использовании смягчителей ткани и отбеливателей.

Ни в коем случае нельзя стирать мембранную одежду в стиральной машине, кроме того, ее нельзя замачивать или выдавливать. Это также отрицательно сказывается на определенных качествах мембраны.

Предварительное замачивание не требуется. Как правило, грязь или пятна легко удаляются с помощью ручной стирки. Во избежание повреждений рекомендуется мыть руки при температуре 30-40 градусов. При ручной стирке мембранной одежды рекомендуется использовать соответствующие жидкие моющие средства.При стирке одежду следует выдавить руками, не перекручивая.

Не используйте смягчители ткани, пятновыводители или отбеливатели, они могут отрицательно повлиять на целостность мембраны.

Частая стирка отрицательно сказывается на качестве материала мембранной одежды, как и любой другой одежды. Однако стирать мембранную одежду необходимо так часто, как это может потребоваться, чтобы удалить различные пятна или грязь, запахи дыма и еды.

Сушка мембранной одежды

Пленочную куртку или брюки можно просто повесить на вешалки для одежды в любом хорошо проветриваемом месте и просушить.

Беречь от прямых солнечных лучей во избежание выцветания верхнего слоя мембранной одежды.

Не рекомендуется сушить мембранную одежду на радиаторе.

Особый уход

Ни в коем случае нельзя гладить мембранную одежду, так как высокая температура может повредить структуру ткани.

Высокий фон в вестерн-блотах

Вестерн-блоттинг - мощный метод анализа экспрессии белков. С помощью этого единственного анализа отдельные белки могут быть оценены на предмет молекулярной массы, посттрансляционных модификаций и численности. Вестерн-блоттинг относительно прост в выполнении и не требует дорогостоящего оборудования или реагентов, что делает их основой для многих лабораторий.

Ключом к успешному вестерн-блоттингу является использование антитела, которое специфически реагирует с одним белком и имеет небольшую перекрестную реактивность с другими белками.Успешный блоттинг также зависит от соотношения сигнал / шум, которое позволяет обнаруживать белок с минимальным фоном. Высокий однородный фон и неравномерный фон с пятнами - частые проблемы при вестерн-блоттинге. В этой вики-статье описаны распространенные причины и решения для высокого фона в Вестерн-блоттинге.

Равномерно высокий фон

Равномерно высокий фон - это фон, который затемняет все пятно, что затрудняет просмотр отдельных полос. Единообразный фон может быть результатом множества причин.

Высокая концентрация антител

Если используются чрезмерно высокие концентрации антител, они могут насыщать и покрывать мембрану, неспецифично связываясь. Это приведет к равномерному высокому фону по всей кляксе. При использовании усиленной хемилюминесценции (ECL) иногда блот даже светится в темноте.

Титруйте антитела

Чтобы снизить высокий фон из-за высокой концентрации антител, титруйте антитела. Дот-блот может использоваться для титрования как первичных, так и вторичных антител в виде шахматной доски.

Недостаточное блокирование

Блокирование мембраны - важный шаг, который предотвращает неспецифическое связывание антител с мембраной. Достаточное блокирование достигается инкубацией блота в соответствующем блокирующем буфере. Тип блокирующего агента, продолжительность и температура инкубации могут влиять на эффективность блокирования.

Блокирующие реагенты

Выбор блокирующего реагента зависит от конкретного взаимодействия антиген: антитело и лучше всего определяется эмпирически.

В качестве первого выбора обычно используется обезжиренное сухое молоко. Часто рекомендуется использовать 5% -ное молоко для блокирования, однако иногда такая концентрация молока может маскировать обнаруживаемый белок, особенно если его не так много. Мы рекомендуем начинать с 1% молока.

Молоко может быть несовместимо с некоторыми антителами и системами обнаружения (см. Влияние несовместимых блокирующих агентов), и в этом случае 3% бычий сывороточный альбумин (БСА) является вторым блокирующим агентом на основе белка, который можно использовать.

Несколько компаний продают безбелковые блокирующие агенты, такие как AdvanBlock-PFby Advansta. Безбелковые агенты предотвращают помехи, но также могут использоваться в комбинации с белковыми агентами для увеличения блокирующей способности.

Продолжительность и температура инкубации

Блокирования в течение 1 часа при комнатной температуре с перемешиванием обычно достаточно для блокирования мембраны. Однако блокирование также можно проводить в течение ночи при 4 ° C с перемешиванием.

Помехи от несовместимых блокирующих агентов

Может наблюдаться однородный высокий фон, когда блокирующие агенты взаимодействуют с антителами, вызывающими помехи.Например, антитела могут связываться с белками в блокирующих средствах на основе белков и приводить к высокому однородному фону. В частности, сыворотка животных, содержащая неочищенные первичные антитела, может связываться с белками животных в блокирующих реагентах. Кроме того, обезжиренное сухое молоко может специфически реагировать с определенными антителами или реагентами для обнаружения. Молоко содержит казеин, фосфопротеин, который может реагировать с фосфоспецифическими антителами. Молоко также содержит различные количества авидина, которые могут мешать работе систем обнаружения авидин-биотина.Оба этих взаимодействия приведут к высокому однородному фону.

Тестируйте разные блокирующие реагенты

Для каждой комбинации антиген: антитело необходимо определить соответствующий блокирующий агент. Как обсуждалось выше, двумя наиболее распространенными блокирующими агентами являются обезжиренное сухое молоко и бычий сывороточный альбумин. Если ни один из этих агентов не подходит, можно использовать реагенты, не содержащие протеин или блокирующие белок неживотного происхождения, такие как AdvanBlock. В качестве альтернативы в качестве блокирующего реагента можно использовать нормальную сыворотку того же вида, что и животное, у которого было продуцировано первичное антитело.

Недостаточная промывка

Важно тщательно промыть блот после инкубации с первичными и вторичными антителами, чтобы удалить избыточные антитела. Плохая стирка может способствовать высокому однородному фону.

Изменение объема, длины и количества промывок

Выполняйте промывки в большом объеме, часто меняйте промывочный раствор и встряхивайте мембрану во время этапов промывки. Рекомендуемый протокол - промывать мембрану 3 раза после каждой инкубации, промывая в течение 5 минут на каждую промывку.Количество стирок и продолжительность стирки можно увеличить для повышения эффективности стирки; однако чрезмерная промывка может снизить мощность сигнала.

Повышение строгости стирки с моющим средством

Строгость этапа стирки можно повысить, включив моющее средство в промывочный раствор, чтобы нарушить неспецифические взаимодействия. Твин-20 (0,05%) обычно используется в промывочных буферах. Для повышения жесткости стирки можно использовать немного более сильное моющее средство, такое как 0,05% NP-40. Примечание. Следует использовать только высокоочищенные моющие средства, поскольку примеси в моющих средствах могут мешать работе систем обнаружения пероксидазы хрена.В моющие растворы следует добавлять свежее моющее средство, так как моющие средства могут способствовать росту бактерий и вызывать высокий фон (см. Бактериальное заражение).

Мембрана

Различные типы мембран (нитроцеллюлоза по сравнению с ПВДФ) и производители и / или партии источников мембран могут влиять на уровень фона. Возраст мембраны и то, как с мембранами обращаются, также могут повлиять на степень полученного фона.

Типы мембран

Выбор мембраны следует определять эмпирически для каждой комбинации антиген: антитело.Мембраны из нитроцеллюлозы, как правило, дают самый низкий фон, однако они хрупкие, их нельзя удалить и повторно зондировать, и многие из них не связывают более мелкие белки. Мембраны из поливинилидендифторида (ПВДФ) обладают высокой связывающей способностью, но могут давать более высокий фон.

Работа с мембраной

Мембраны из ПВДФ требуют активации в метаноле и уравновешивания в воде перед использованием. Если эти шаги пропущены или выполнены неправильно, будет виден высокий однородный фон. Обратитесь к инструкциям производителя для протокола.

Мембраны никогда не должны высыхать, так как это также приведет к высокому однородному фону.

Использование предварительно нарезанных мембран, таких как предварительно нарезанные ПВДФ или нитроцеллюлозные мембраны, продаваемые Advansta, может минимизировать манипуляции и контакт с грязными ножницами.

Источник мембраны

Фоновые уровни также могут варьироваться в зависимости от поставщика мембран. Если виден высокий фон, можно попробовать другой источник для уменьшения фона.

Возраст мембраны

Старые мембраны могут давать высокий однородный фон, поэтому обращайте внимание на сроки годности и используйте новые мембраны для уменьшения фона.

Бактериальное заражение

Бактериальное заражение буферов может привести к высокому фону.

Буферы, содержащие детергент и молоко, которые могут способствовать росту бактерий, должны быть свежими.

Передержка мембраны

Длительная выдержка увеличивает общий фон без увеличения чувствительности.

Можно попробовать несколько вариантов уменьшения времени выдержки. Если возможно, загрузите больше белка, чтобы увеличить количество целевого антигена.Убедитесь, что первичное антитело хорошо титровано. Если возможно, попробуйте другие первичные антитела. В качестве альтернативы можно использовать реагент для обнаружения, разработанный для белков с низким содержанием, таких как субстрат Advansta WesternBright Quantum HRP.

Пятнистый, неровный или пятнистый фон

В дополнение к высокому однородному фону, фон Вестерн-блоттинга может включать неровный пятнистый фон, случайные черные пятна, белые пятна или очищенные области, неровные полосы и случайные пятнышки. У такого фона есть несколько причин.

Dirt

Хемилюминесцентные реагенты притягиваются к пыли и грязи, которая может попасть на блот во время промывки или попасть на блот из грязного оборудования. Фон из пыли и грязи обычно выглядит как случайные крапинки на кляксе.

Start без грязи

Чтобы предотвратить загрязнение пылью и грязью, вымойте все оборудование, которое соприкасается с мембраной, включая устройство для переноса и лотки, используемые для инкубации. Отфильтруйте все буферы и растворы, чтобы удалить частицы.Держите посуду крышками, чтобы пыль не попадала в растворы во время инкубации.

Воздушные пузырьки

Если пузырьки воздуха находятся на мембране во время переноса, они будут препятствовать прилипанию белков к мембране. Если пузырьки прикрепятся к мембране позже, они могут помешать блокирующему раствору или антителам получить доступ к мембране. Пузырьки воздуха могут вызвать появление пятен, белых кругов или очищенных участков, а также неполных полос.

Пузырьки воздуха во время установки переноса

Чтобы предотвратить образование пузырьков воздуха при установке переноса, осторожно оберните пипеткой каждую часть в стопке «сэндвич» (мембрана, фильтровальная бумага, губка для переноса) после того, как она будет установлена ​​на место .

Пузырьки воздуха во время переноса и инкубации

Воздух создается в буфере для переноса из-за смешивания метанола с водным буфером. По возможности приготовьте буфер для переноса за 1-2 дня. Если необходимо использовать свежий буфер, дегазируйте буфер фильтрацией, вакуумом или обработкой ультразвуком. Кроме того, используйте более низкое напряжение, чтобы предотвратить образование пузырей.

Избегайте чрезмерного перемешивания блоттинга во время инкубации и образования пузырей.

Плохое обращение с мембраной

Пятна, линии и темные пятна часто возникают из-за неправильного обращения с мембраной.

Манипуляции с мембранами

Всегда беритесь с мембранами руками в перчатках и используйте щипцы для манипуляций. Масло на руке приведет к появлению темных пятен. Будьте осторожны, чтобы мембрана не складывалась, это приведет к темным линиям. Не царапайте мембрану при добавлении растворов или использовании пинцета. Убедитесь, что мембрана пропитана растворами во время инкубации, чтобы предотвратить высыхание участков.

Активация и уравновешивание PVDF

При использовании PVDF важно активировать мембрану, а затем уравновесить мембрану в водном растворе, как описано выше.Когда метанол вступает в реакцию с водными растворами, образуются пузырьки воздуха, которые могут прилипать к мембране и препятствовать уравновешиванию и диффузии, создавая пятнистый фон. Убедитесь, что мембрана уравновешена в соответствии с инструкциями производителя. Если существует разница температур между растворами (т.е. вода холодная, а метанол имеет комнатную температуру), то метанол может не вытесняться должным образом; поэтому старайтесь поддерживать равномерную температуру при изготовлении мембраны.

Недостаточное перемешивание компонентов буфера

Компоненты буфера, такие как детергенты и блокирующие агенты, могут прилипать к мембране и вызывать темные пятна, если они не полностью растворены.Это особенно характерно для обезжиренного сухого молока.

Полностью перемешайте компоненты буфера

Перед использованием убедитесь, что все растворы тщательно перемешаны; блокирующие растворы можно перемешивать. Растворы также можно профильтровать перед использованием.

Антитело неравномерно распределяется во время инкубации

Неравномерный пятнистый фон или неполные полосы могут возникать, если антитело неравномерно распределено по мембране во время инкубации.

Держите мембрану покрытой растворами

Используйте достаточно раствора антител, чтобы полностью покрыть мембрану.Во время инкубации встряхивайте блот на шейкере.

Избыточное количество реагентов для обнаружения на блоте

Если реагенты для обнаружения скапливаются на мембране неравномерно, это может привести к образованию пятен на фоне.

Удалите излишки реагентов обнаружения

Для удаления избытка реагентов обнаружения осторожно промокните белковую сторону мембраны салфеткой Kim-wipe или быстро опустите мембрану на фильтровальную бумагу, чтобы удалить жидкость. Перед экспонированием оберните мембрану полиэтиленовой пленкой, чтобы предотвратить дальнейшее высыхание.

См. Раздел «Несколько диапазонов» для устранения неполадок вестерн-блотов с несколькими дискретными диапазонами. Также см. Наш блог, чтобы узнать о быстром протоколе вестерн-блоттинга.

Фото любезно предоставлено Агнес Периапс.

Руководство по устранению неполадок вестерн-блоттинга | Cell Signaling Technology

Общий фон высокий или неспецифические полосы появляются после непродолжительного воздействия блоттинга на пленку. Помните о том, что антитела по мотивам, посттрансляционные модификации и варианты сплайсинга могут приводить к множественному образованию полос.

Препарат лизата

Свежеприготовленные образцы дают меньше неспецифических полос и полос деградации и, следовательно, дают более чистый блот. Как правило, экстракты тканей, как правило, содержат больше фоновых полос и продуктов разложения, чем экстракты клеточных линий из-за соединительной ткани. Использование свежих, обработанных ультразвуком и очищенных экстрактов тканей может уменьшить фон. Образцы всегда следует лизировать в подходящих буферах, которые включают ингибиторы протеаз и ингибиторы фосфатазы для фосфатаз (коктейль ингибиторов фосфатазы (100X) # 5870, коктейль ингибиторов протеазы / фосфатазы (100X) # 5872, коктейль ингибиторов протеаз # 5871).Мы рекомендуем использовать буфер для лизиса клеток (№ 9803) или буфер RIPA (№ 9806), который содержит более сильный детергент, для подготовки образцов и количественного определения концентрации белка. Загрузочный буфер SDS (№7722 или №7723) можно использовать для лизиса целых клеток без количественного определения белка. Буфер экстракта клеток Chaps (# 9852) используется для приготовления фракций цитоплазматических клеток и полезен для изучения передачи сигналов каспазы. Набор для фракционирования клеток (№ 9038) используется для получения фракций цитоплазматических, мембранных / органелл и ядерных / цитоскелетных клеток.

Мембрана

Используйте высококачественную нитроцеллюлозную мембрану (Nitrocellulose Sandwiches № 12369). Обычно рекомендуется размер пор 0,2 мкм; мембраны с размером пор 0,45 мкм не рекомендуются для белков менее 30 кДа. Мембраны из ПВДФ могут давать более высокий фон, чем нитроцеллюлоза. Нейлоновые мембраны не рекомендуются для вестерн-блоттинга. Блокируйте в течение 1 часа при комнатной температуре в 5% обезжиренном сухом молоке в TBST.

Первичное разведение и / или инкубация антител

Инкубируйте первичные антитела в течение ночи при 4 ° C в TBST в рекомендованном разведении с рекомендованным блокирующим агентом (5% BSA или 5% обезжиренного сухого молока).Для индивидуальных антител, пожалуйста, обратитесь к таблице данных продукта для рекомендованного буфера для разведения.

Неправильная стирка

Промывание в течение меньшего времени, чем рекомендуется три раза по 5 минут в TBST, является обычным явлением и может привести к высокому фону. Мы рекомендуем рассчитывать время стирки для обеспечения точности. Кроме того, низкий уровень твина ® 20 может способствовать возникновению высокого фона; мы рекомендуем 0,1% Tween® 20. Это относится к этапам промывки после инкубации как первичных, так и вторичных антител.

Вторичное разведение антител и / или инкубация

Некоторые вторичные антитела неспецифически связываются с белками клеточных экстрактов. Чтобы оценить качество вторичных антител, выполните блоттинг (вплоть до экспонирования пленки) без первичных антител. Серийные разведения вторичных антител могут быть выполнены на блотах с теми же клеточными экстрактами и первичными антителами для оптимизации концентрации вторичных антител. Всегда инкубируйте вторичные антитела в 5% обезжиренном сухом молоке в TBST в течение 1 часа при комнатной температуре, разбавление вторичных антител в BSA дает более высокие уровни фоновых полос.Вторичные антитела CST ™ уже оптимизированы и не требуют титрования.

Реагент обнаружения

Хемилюминесцентное обнаружение требует использования воды высокой чистоты для разбавления концентрированных реагентов. Используйте только очищенную воду без органических и неорганических примесей. Мы рекомендуем использовать воду RODI. Кроме того, убедитесь, что мембрана никогда не высыхает во время процесса инкубации антител до воздействия реагента обнаружения.

Время выдержки

Время экспонирования пленки более 30 секунд приводит к усилению фонового сигнала. Чтобы избежать длительного воздействия, важно использовать клеточные линии или ткани с адекватными уровнями экспрессии белка и использовать рекомендуемые условия инкубации первичных антител (см. Раздел о разведении и / или инкубации первичных антител). При необходимости используйте лечение, чтобы вызвать выражение или изменение.

Интересующий белок не может быть обнаружен после непродолжительного воздействия блоттинга на пленку.

Препарат лизата

Обычно для обнаружения достаточно 20–30 мкг общего белка из экстрактов цельных клеток на дорожку. Если базальные уровни целевого белка или модификации белка низкие, может потребоваться вызвать экспрессию или модификацию с помощью химического стимулятора. Вы можете исследовать альтернативные клеточные линии или ткани, в которых больше интересующего белка. Образцы всегда следует лизировать в соответствующих буферах, которые включают ингибиторы протеаз и ингибиторы фосфатаз, для фосфатаз (коктейль ингибиторов фосфатазы (100X) # 5870, коктейль ингибиторов протеазы / фосфатазы (100X) # 5872, коктейль протеаз # 5871).Лизаты всегда следует обрабатывать ультразвуком, чтобы обеспечить эффективную экстракцию белка из хроматина и мембраносвязанных мишеней. Пожалуйста, посетите Таблицу контроля на нашем веб-сайте, чтобы узнать о рекомендуемых положительных контролях и методах лечения.

Первичное разведение и / или инкубация антител

Инкубируйте первичные антитела в течение ночи при 4 ° C в TBST в рекомендованном разведении с рекомендованным блокирующим агентом (5% BSA или 5% обезжиренного сухого молока). Использование альтернативных блокирующих агентов, таких как желатин, сыворотка, безбелковые блокирующие агенты, казеин или смешанные блокирующие агенты, может снизить интенсивность сигнала цели.Для получения оптимальных результатов с отдельными антителами, пожалуйста, обратитесь к таблице данных продукта для рекомендованного буфера для разведения.

SDS-PAGE Выбор геля

Как правило, рекомендуются гели с трис-глицином. Однако для высокомолекулярных белков мы рекомендуем трис-ацетатные гели и соответствующие буферы. Белки переносятся более эффективно из гелей размером 1 мм, чем из гелей 1,5 мм. Использование более толстых гелей может привести к неполному переносу высокомолекулярных белков, поэтому мы рекомендуем контролировать эффективность переноса и вносить изменения в условия переноса, чтобы оптимизировать размер интересующей белковой мишени.

Трансфер и мембрана

Неполный переход можно исправить более длительным переключением или использованием более высокого напряжения. Как правило, мы рекомендуем включать 20% метанол в буфер для переноса и выполнять влажный перенос в течение 2 часов при 70 В. Для белков с высокой молекулярной массой мы рекомендуем уменьшить содержание метанола в буфере для переноса до 5%, чтобы повысить эффективность переноса и избежать фиксации больших объемов. белков в гелевой матрице, а также увеличение времени переноса до 3 часов при 70 В.Избыточный перенос (перенос белка через мембрану) может быть проблематичным при исследовании более мелких белков. Для небольших белков важно использовать мембрану с размером пор 0,2 мкм и влажный перенос в течение 1,5 часов при 70 В, а не мембрану с размером пор 0,45 мкм или перенос в течение ночи, что может привести к избыточному переносу и отсутствию сигнала малого белка.

Блокировка

Слишком долгое блокирование мембраны может скрыть антигенные эпитопы и помешать связыванию антитела.Заблокируйте всего на 1 час при комнатной температуре.

Стиральная

Промывка дольше трех раз по 5 мин является распространенной проблемой и может привести к снижению сигнала. Мы рекомендуем рассчитывать время стирки для обеспечения точности. TBST должен содержать 0,1% Tween® 20. Это относится к этапам промывки после инкубации как первичных, так и вторичных антител. Кроме того, мы рекомендуем промывать в TBST, поскольку было показано, что промывание в PBST приводит к снижению сигнала.

Вторичное разведение антител и / или инкубация

Серийные разведения вторичных антител могут быть выполнены на блотах с теми же клеточными экстрактами и первичными антителами для оптимизации концентрации вторичных антител. Всегда инкубируйте вторичные антитела в 5% обезжиренном сухом молоке в TBST в течение 1 часа при комнатной температуре. Избегайте включения азида натрия в буферы вторичных антител, конъюгированных с HRP, поскольку азид ингибирует активность HRP. Вторичные антитела CST ™ уже оптимизированы и не требуют титрования.

Реагент обнаружения

Используйте биотинилированные стандарты молекулярной массы, которые могут быть обнаружены с помощью анти-биотина-HRP, в качестве положительных контролей для хемилюминесцентного обнаружения.

общих ошибок количественной оценки в денситометрии вестерн-блоттинга и предлагаемые меры по их устранению

Данные денситометрии, полученные для вестерн-блоттинга, обычно используются для сравнения содержания белка в образцах. В последнее десятилетие стало очевидно, что предположения, лежащие в основе этих сравнений, часто нарушаются в исследованиях, сообщающих в литературе о данных вестерн-блоттинга.Эти нарушения могут привести к ошибочной интерпретации данных и могут способствовать плохой воспроизводимости исследования. Мы оценили надежность данных вестерн-блоттинга, полученных для изучения белков ткани миометрия человека. Мы провели серии разведений белковых лизатов, чтобы изучить линейность данных денситометрии. Анализируемые белки включали αSMA, HSP27, ERK1 / 2 и GAPDH. Хотя идеальные данные денситометрии прямо пропорциональны изобилию белка, наши данные подтверждают, что данные денситометрии часто отклоняются от этого идеала, и в этом случае они могут соответствовать непропорциональным линейным или гиперболическим математическим моделям и могут достигать насыщения.Данные нелинейной денситометрии наблюдали, когда вестерн-блоттинг детектировали с использованием инфракрасной флуоресценции или хемилюминесценции и в различных условиях SDS-PAGE. Мы подтверждаем, что артефакты-фантомы, связанные с переизбытком интересующих белков в Вестерн-блоттинге, могут исказить результаты. Мы также подтверждаем, что, когда данные, подлежащие нормализации, не прямо пропорциональны изобилию белка, ошибочно использовать метод нормализации разделения данных денситометрии от интересующего белка на данные денситометрии от загрузки контрольного белка (ов), так как это может привести к невозможности использования нормализованных данных для сравнений.Используя добавленные белки таким образом, чтобы мы могли контролировать общее количество белка на дорожку, изменяя при этом только количество добавленных белков, мы подтверждаем, что нелинейность и насыщенность данных денситометрии, а также ошибки, вносимые процессами нормализации, могут возникать в рутинных анализах сравните равные количества лизата. Эти результаты применимы ко всем исследованиям вестерн-блоттинга, и мы выделяем проверки контроля качества, которые необходимо выполнять, чтобы данные вестерн-блоттинга были более количественными.

1.Введение

Вестерн-блоттинг обычно используется для обнаружения белков и их посттрансляционных модификаций (PTM) в биологических образцах. Разработка и широкое распространение современных устройств визуализации, которые захватывают цифровые изображения вестерн-блоттинга, визуализируемые с помощью хемилюминесцентного или флуоресцентного детектирования, привели к предположению о количественном вестерн-блоттинге в литературе. Каждому пикселю в этих цифровых изображениях присваивается значение интенсивности, которое связано с количеством фотонов, обнаруженных соответствующим пикселем в датчике, до тех пор, пока он не достигнет насыщения [1].Насыщенные изображения без детектора используются для количественного анализа, а содержание белка / PTM чаще всего измеряется с использованием алгоритма оптической плотности (O.D.), который вычисляет O.D. значения из скорректированной на фон интенсивности полосы и площади полосы интересующего белка / PTM. Все специализированное программное обеспечение для Вестерн-блоттинга от основных поставщиков обеспечивает возможность измерения О. с небольшими вариациями между производителями в реализации.

Идеальный наружный диаметр данные пропорциональны содержанию белка / PTM и поэтому лучше всего моделируются с помощью линейной регрессии по источнику (далее именуемой прямо пропорциональной или пропорциональной линейной моделью, уравнение y = mx) [2–5].Принято считать, что эта модель соответствует внешнему диаметру. данные [5], и лишь изредка экспериментальные данные, подтверждающие это предположение, включаются в опубликованные исследования. Однако недавние исследования показали, что О. данные могут нарушить это предположение, и в этих случаях лучше моделировать непропорциональными линейными функциями (уравнение y = mx + b) или нелинейными гиперболическими функциями [2, 4–6]. Определение подходящей модели для O.D. данные имеют решающее значение, поскольку анализ данных с использованием неподходящей модели приводит к неверной оценке величины любых различий в содержании белка / PTM между образцами [2, 4, 5, 7].В крайних случаях данные вестерн-блоттинга могут стать насыщенными (независимо от насыщения системы обнаружения), после чего дальнейшее увеличение содержания белка не может быть обнаружено и / или измерено [2–21]. Нецелесообразно количественно анализировать данные насыщенного вестерн-блоттинга, поскольку различия в содержании белка / PTM между образцами могут быть пропущены, что приводит к ложноотрицательным результатам [3, 4, 8, 12, 13].

Большинство количественных исследований вестерн-блоттинга нормализуют уровни целевого (ых) белка (ов) / PTM (ов) до уровней загрузочного контрольного (ых) белка (ов), которые не меняются в количестве между сравнениями [7, 9–12, 17, 18, 20, 22].Этот метод нормализации используется для корректировки различий в содержании белка, которые не имеют отношения к рассматриваемому биологическому вопросу [7, 9–12, 17, 18, 20, 22]. Нормализация обычно выполняется путем деления O.D. значение целевого белка / PTM по O.D. значение загрузки контрольного белка (белков), которые были обнаружены в одном и том же образце [6, 10, 12, 13] и в идеале были проанализированы в той же полосе геля и обнаружены в той же вестерн-мембране [23]. Это соотношение (мишень / контроль нагрузки) используется для сравнений, и считается, что любое различие между образцами соответствует разнице в содержании целевого белка / PTM.Однако широко не признается, что эта стратегия нормализации действительна только тогда, когда О. данные соответствуют прямо пропорциональным моделям [4–6, 24]. Учитывая, что в лучшем случае О.Д. данные соответствуют только прямо пропорциональным моделям в ограниченных диапазонах разведения лизата [2–21, 25], возможно, что многие исследования вестерн-блоттинга с использованием этого подхода нормализации были скомпрометированы из-за неправильных предположений.

Вестерн-блоттинг - один из наиболее распространенных экспериментальных инструментов, используемых для изучения белков в репродуктивной биологии, включая исследования функции гладких мышц миометрия.В этой области стандартной практикой является нормализация O.D. данные белков-мишеней для загрузки контрольных белков, таких как альфа-актин гладких мышц (αSMA) [26–28], β-актин [29], глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH) [30] и α- тубулин [31]. Также характерно, что данные, специфичные для ПТМ, нормализуются к общему уровню целевого белка [28, 32, 33]. Мы провели случайный поиск по более чем 100 проиндексированным PubMed статьям, опубликованным в период с 2005 по 2017 год, в которых исследовалась функция миометрия с помощью количественного вестерн-блоттинга, и обнаружили, что только одна [30] представила данные валидации вестерн-блоттинга либо в основном тексте, либо в дополнительных материалах.

Наше исследование было направлено на проверку того, могут ли количественные эксперименты с вестерн-блоттингом, использующие непроверенные предположения о пропорциональности для нормализации, вводить в заблуждение и влиять на изучение белков ткани миометрия человека. Подобные ошибки могут происходить во всех исследованиях Вестерн-блоттингом, независимо от типа образца [2–21, 25]. В то время как неопределенная специфичность антител ставит под угрозу достоверность любого анализа вестерн-блоттингом [2, 3, 20, 34–37], вестерн-блоттинг, выполняемый с использованием антитела, которое не распознает правильную мишень, может быть зафиксирован только путем замены его на то, которое распознает.Поэтому мы сосредотачиваемся на возможных ошибках, которые могут возникнуть на этапах количественной оценки вестерн-блоттинга.

В рамках этих исследований мы всесторонне сравнили детекцию вестерн-блоттингом с помощью хемилюминесценции и инфракрасной флуоресценции и предоставили пример количественного анализа вестерн-блоттингом с использованием надлежащего рабочего процесса.

Мы надеемся, что расширение знаний об ограничениях количественной оценки Вестерн-блоттинга позволит ученым лучше использовать эту технологию для получения значимых данных и, следовательно, приведет к регулярному включению данных валидации в будущие публикации.

2. Материалы и методы
2.1. Экстракция и подготовка белка

Эти исследования были одобрены Комитетом по этике исследований человека в районе Хантера и Новой Англии в соответствии с рекомендациями Университета Ньюкасла и больницы Джона Хантера, Ньюкасл, Австралия (02.06.12 / 3.13). Биопсии ткани миометрия были взяты во время кесарева сечения у доношенных и доношенных женщин, которые дали информированное письменное согласие. Эти образцы мгновенно замораживали в жидком азоте (LN 2 ) и хранили при -80 ° C.После обработки образцы всегда хранили на сухом льду между этапами, пока они не были погружены в буфер для лизиса белка. Ткани измельчали ​​в металлической ступке пестиком. Образцы помещали в ступку в небольшую емкость с LN 2 и измельчали, ударяя пестиком молотком сразу после испарения LN 2 . После измельчения образцы погружали в LN 2 , затем переносили в отдельные пробирки Precellys CK28-R объемом 1,5 мл (каталожный № KT03961-1-007.2, Bertin Technologies).Ступку и пестик очищали 70% этанолом и предварительно охлаждали LN 2 для каждого образца. После измельчения всех образцов их помещали на лед и лизировали в 1 мл 2D буфера для экстракции (8 M мочевина, 2 M тиомочевина, 4% CHAPS) или 1 мл буфера для экстракции SDS (2% SDS, 50 мМ Tris pH 6,8). , 5 мМ ЭДТА). В обоих буферах для лизиса использовали полные таблетки коктейля с ингибитором мини-протеазы (Кат. № 4693124001, Roche) и таблетки с ингибитором фосфатазы PhosSTOP (Кат. № 4

7001, Roche). После добавления буфера для лизиса образцы немедленно гомогенизировали в гомогенизаторе Precellys 24 (Bertin Technologies) при 5000 об / мин с использованием интервалов гомогенизации 2 × 30 секунд с перерывом в 20 секунд между каждой гомогенизацией.Затем образцы хранили на льду в течение 2 минут, чтобы предотвратить нагревание образцов, и этап гомогенизации Precellys повторяли еще дважды. Затем образцы центрифугировали в течение 10 минут при 16000 g при 4 ° C для осаждения нерастворимых клеточных остатков. Супернатант экстрагировали, переносили в свежие пробирки и хранили при -80 ° C. Количество белка в каждом образце оценивали с помощью анализов количественного определения белка, проводимых в соответствии с инструкциями производителя. Двумерные экстракты количественно оценивали с использованием набора 2-D Quant (Кат. № 80-6483-56, GE Life Sciences).Образцы SDS были количественно определены с использованием набора BCA Protein Assay Kit (каталожный № 23227, Thermo Fisher Scientific). Измерения проводили в 96-луночном планшете с плоским дном при длине волны 480 нм для 2-D Quant Kit и длине волны 562 нм для набора BCA Protein Assay Kit с использованием планшет-ридера SPECTROstar Nano (BMG LABTECH). Объединенные образцы были созданы путем смешивания равных количеств белка (мкг общего белка) отдельных образцов, которые были экстрагированы в одном буфере для лизиса. Концентрацию белка в объединенных образцах повторно оценивали с использованием соответствующего набора для количественной оценки, указанного выше для буфера 2D или SDS.Каждый отдельный образец, а также объединенные образцы разделяли на аликвоты и хранили при -80 ° C.

2.2. Добавление рекомбинантных белков в гомогенаты миометрия

В экспериментах по добавлению белка использовались объединенные гомогенаты миометрия человека, полученные из 3 неработающих тканей, которые были экстрагированы в буфере для лизиса 2D. Экстракция этих образцов, объединение и количественная оценка белка были выполнены так же, как 2D экстракции, описанные выше. Этот объединенный образец разбавляли до 2 мг / мл в 1 мл буфера для лизиса 2D.900 мкл (1800 мкг) этого образца использовали для восстановления 100 мкг очищенного рекомбинантного ENPP1 (каталожный номер Ab167943, Abcam), а затем 100 мкг Fam3a (каталожный номер Ab167946, Abcam), а затем довели до конечного объема. 1 мл. Последующий количественный анализ общего белка (запуск 2-D Quant Kit в соответствии с инструкциями производителя) подтвердил, что содержание белка все еще составляло приблизительно 2 мг / мл. Этот метод добавления белка позволил создать образец, в котором каждый добавленный белок составлял приблизительно 10% от общего количества белка в лизате.Затем этот образец последовательно разбавляли 1: 1 объединенным лизатом без добавок с концентрацией 2 мг / мл для создания восьми 2-кратных серийных разведений, которые содержали уменьшающиеся количества добавленных белков при одинаковых концентрациях общего белка. Затем эти образцы разделяли на аликвоты и хранили при -80 ° C, и для каждой мембраны использовали индивидуальную аликвоту. Разделение белков и вестерн-блоттинг выполняли с использованием того же оборудования, что и образцы SDS, описанные ниже. Сигналы вестерн-блоттинга для рекомбинантных ENPP1 и Fam3a одновременно визуализировали на одних и тех же мембранах вестерн-блоттинга с использованием антитела против 6x-His-tag (подробности см. В дополнительной таблице S1), которое распознает 6x-His-tag, присутствующий на обоих белках.

2.3. Электрофорез в SDS-полиакриламидном геле и перенос через мембрану

Исходные аликвоты объединенных гомогенатов ткани миометрия размораживали на льду, нагревали до комнатной температуры и затем встряхивали для обеспечения полной суспензии белков. Образцы проверяли на глаз, чтобы убедиться в отсутствии осадков. Если наблюдались осадки, образцы оставляли на 1 мин при комнатной температуре, а затем подвергали повторной вортексии. Это повторяли до тех пор, пока образцы не стали полупрозрачными. Затем образцы по возможности хранили на льду, стараясь избежать образования осадка.Каждое разведение лизата готовили как исходный образец объемом не менее 10 мкл, и независимо приготовленный исходный образец использовали для каждой мембраны, в которой был обнаружен один и тот же белок (белки). Образцы, загруженные в гели, доводили до того же конечного объема с использованием необходимых количеств исходного образца, буфера для образца на основе додецилсульфата лития (LDS), восстанавливающего агента и буфера для лизиса. Каждый образец нагревали при 70 ° C в течение 10 минут, затем центрифугировали в течение 15 секунд на микроцентрифуге Heraeus Pico, установленной на 16000 g, и загружали в соответствующие гели.В подписях к рисункам указано, была ли каждая серия разведений последовательной или независимой. Использовали стандарт предварительно окрашенного протеина Novex Sharp (каталожный номер LC5800, Thermo Fisher Scientific), MagicMark XP (каталожный номер LC5602, Thermo Fisher Scientific) и стандарт предварительно окрашенного протеина SeeBlue Plus2 (каталожный номер LC5925, Thermo Fisher Scientific). для определения молекулярной массы.

2.4. Разделение и перенос белков на мембраны 2D-образцов, не содержащих рекомбинантные белки

Все 2D-образцы, в которые не добавлялись рекомбинантные белки, обрабатывали на 12-луночных гелях 4-12% NuPAGE Bis-Tris толщиной 1 мм (кат.№ NP0322, Thermo Fisher Scientific). Каждый загруженный образец состоял из лизата, разведенного в буфере для лизиса 2D, и подходящем количестве буфера для образцов NuPAGE LDS (каталожный номер NP0008, Thermo Fisher Scientific) и восстанавливающего агента NuPAGE (каталожный номер NP0009, Thermo Fisher Scientific). Разделение белков выполняли сразу после загрузки геля при 200 В, 120 мА и 25 Вт в течение 55 минут в рабочем буфере NuPAGE MOPS SDS (каталожный номер NP0001-02, Thermo Fisher Scientific). Затем белки переносили на нитроцеллюлозу, усиленную Optitran BA-S 85 (кат.№ 10439196, GE Life Sciences) или мембрану Immobilon-PSQ из поливинилидендифторида (PVDF) (№ по каталогу ISEQ00010, EMD Millipore) в буфере для переноса 1 × NuPAGE (№ по каталогу NP0006-1, Thermo Fisher Scientific), содержащем 10% метанол. Мембраны из ПВДФ были предварительно смочены в 100% метаноле в течение 1 мин перед переносом. Белки переносили при 25 В, 120 мА и 17 Вт в течение 1 ч и 10 мин. SDS-PAGE и этапы переноса проводили в XCell SureLock Mini Gel Tank (Thermo Fisher Scientific) на блоке питания Power Zoom-dual или Power Ease 500 (Thermo Fisher Scientific).

2.5. Разделение и перенос белков на мембраны для образцов SDS и 2D образцов, содержащих рекомбинантные белки

Все образцы SDS обрабатывали на 10-луночных гелях толщиной 1 мм 4-12% Bolt Bis-Tris Plus (Кат. № NW04120, Thermo Fisher Scientific ). Каждый образец, загруженный в каждый гель, состоял из лизата, разведенного в буфере для лизиса SDS, и подходящем количестве буфера для образцов Bolt LDS (каталожный номер B0007, Thermo Fisher Scientific) и восстанавливающего агента Bolt (каталожный номер B0009, Thermo Fisher Scientific).2D образцы, содержащие рекомбинантные белки, показанные на фиг. 4, обрабатывали на гелях одного и того же типа и переносили на мембраны того же типа в идентичных условиях. После загрузки гелей белки разделяли при 165 В и 125 мА в течение 45 минут в 1 × Bolt MOPS SDS Running Buffer (Кат. № B000102, Thermo Fisher Scientific), а затем белки переносили на нитроцеллюлозные мембраны Odyssey (Кат. . 926-31092, LI-COR Bioscience) при 10 В и 160 мА в течение 1 ч с использованием буфера переноса 1 × Bolt (Кат.BT00061, Thermo Fisher Scientific), содержащий 10% метанола. Перенос этих белков в SDS-PAGE и вестерн-блоттинг проводили в мини-гелевых резервуарах Bolt (Thermo Fisher Scientific) с использованием блоков питания PowerEase 90 Вт (Thermo Fisher Scientific). Для получения примера вестерн-блоттинга, показанного на рисунке 5, два образца, содержащие рекомбинантные белки ENPP1 и Fam3a, были разбавлены 1: 10 буфером для мечения, поставляемым в наборе Amersham QuickStain (каталожный номер RPN4000, GE Life Sciences), до концентрации белка 0.2 мкг / мкл. Стандартная кривая была построена путем приготовления серии 2-кратных серийных разведений лизата из другого образца, содержащего эти добавленные рекомбинантные белки, с использованием буфера для мечения из набора Amersham QuickStain в качестве разбавителя (концентрации белка в этих стандартах варьировались от 0,0125 до 0,4 мкг. / мкл). 10 мкл каждого образца (2 мкг общего белка для образцов, обработанных как неизвестные, и от 0,125 до 4 мкг общего белка для стандартов) объединяли с 6,25 мкл буфера для мечения Amersham QuickStain, 6.25 мкл буфера Bolt 4 × LDS и 1 мкл неразбавленного красителя Cy5 из набора Amersham QuickStain. Реакцию мечения выполняли в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего ее останавливали добавлением 2,5 мкл 10-кратного восстанавливающего агента. Затем все образцы нагревали в течение 10 минут при 70 ° C, а затем подвергали импульсному вращению в течение 15 секунд на микроцентрифуге Heraeus Pico, установленной на 10 000 г, и загружали на 12-луночный 4-12% гель Bis-Tris SDS-PAGE толщиной 1 мм. (Кат. № NW04122, Thermo Fisher Scientific). После загрузки геля его немедленно запускали при 165 В и 125 мА в течение 50 мин в рабочем буфере 1 × Bolt MOPS SDS.После SDS-PAGE гель промывали 3 × 30 с в буфере для переноса 1 × Bolt, содержащем 10% метанол, а затем, после увлажнения буфером для переноса, его флуоресцентно отображали с использованием установки GE Life Sciences AI600 для обнаружения Cy5 ( примерно 10 минут захвата изображения). Затем белки переносили на усиленную Protran нитроцеллюлозную мембрану (каталожный № 10600016, GE Life Sciences) на 1 час при 10 В, 165 мА в буфере для переноса 1 × Bolt, содержащем 10% метанола. После этапа переноса мембрану промывали водой MilliQ, и Cy5-меченные белки, присутствующие на мембране, получали флуоресцентное изображение с использованием GE AI600 (приблизительно 5 минут захвата изображения).Мембрану промывали трис-забуференным физиологическим раствором с 0,1% твином-20 (TBST) и блокировали 5% сухим обезжиренным молоком в TBST в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем мембрану инкубировали с первичным антителом (антитело против 6x-His-tag, описанное в дополнительной таблице S1), разведенным 1/1000 в 5% сухом обезжиренном молоке в TBST, в течение приблизительно 18 часов при 4 ° C. Затем мембрану промывали 3 × 5 мин в TBST и инкубировали со вторичными антителами, конъюгированными с мышиным IgG и пероксидом хрена (HRP) (описанными в дополнительной таблице S1), разведенными 1/3000 в 5% сухом обезжиренном молоке в TBST для 1 час при комнатной температуре.Перед обнаружением мембрану промывали 3 × 5 мин в TBST и разрезали пополам по горизонтали, а верхнюю половину, содержащую рекомбинантный ENPP1, проявляли погружением в субстрат Luminata Classico Western HRP (каталожный номер WBLUCO100, EMD Millipore) на 1 минуту при температуре комнатная температура. Нижняя половина, содержащая Fam3a, проявлялась погружением в субстрат Luminata Forte Western HRP (каталожный номер WBLUF0100, EMD Millipore) на 5 минут при комнатной температуре. После проявления лишний субстрат слили, и изображения были немедленно сняты на AI600.

2.6. Окрашивание общего белка и вестерн-блоттинг

За исключением вестерн-блоттинга, показанного на фиг. 5, для которого использованный метод описан выше, все другие мембраны сушили между фильтровальной бумагой в течение ночи сразу после стадии переноса. Перед проведением окрашивания Ponceau S мембраны из ПВДФ погружали в 100% метанол на 1 мин, затем в воду MilliQ на 1 мин, а мембраны из нитроцеллюлозы погружали в воду MilliQ на 1 мин. Затем мембраны окрашивали в течение 5 мин в 100 мл раствора Ponceau S (0.1% мас. / Об. Ponceau S (кат. № P3504-50G, Sigma-Aldrich) в 5% уксусной кислоте). Блоты промывали 3 × 1 мин в 100 мл воды MilliQ и отображали с использованием систем визуализации GE Life Sciences LAS-3000 или AI600 Western. Изображения, снятые на LAS-3000, были сделаны с использованием светового освещения с выдержкой 1/60 с. Изображения на AI600 были получены с использованием автоматической экспозиции при колориметрических настройках. Затем мембраны обесцвечивали с помощью промывок 6 × 5 мин в TBST или фосфатно-солевом буфере (PBS) для хемилюминесценции и инфракрасного обнаружения соответственно.Любые блоты, не окрашенные Ponceau S, регидратировали и подвергали той же обесцвечивающей промывке, что и окрашенные блоты. Блокирование мембран для вестерн-блоттинга выполняли сразу после обесцвечивания Ponceau S. Эксперименты по вестерн-блоттингу проводили при комнатной температуре с использованием 1 ч инкубации для мембранного блокирования, 2 ч инкубации для первичных антител и 1 ч инкубации для вторичных антител. Таблица S1 в дополнительных материалах содержит конкретные сведения об используемых антителах, условиях блокирования и инкубации первичных антител для обнаружения хемилюминесценции, а также используемых разведениях антител.Все мембраны, обнаруженные с помощью инфракрасной флуоресценции, были заблокированы в блокирующем буфере Odyssey (OBB) (каталожный номер 927-40000, LI-COR Bioscience), и все первичные антитела, используемые на этих мембранах, были разведены в OBB, содержащем 0,1% Tween-20, до такая же концентрация, что и на мембранах, обнаруживаемых с помощью хемилюминесценции. В обоих методах между инкубациями первичных и вторичных антител, а также после инкубации вторичных антител перед визуализацией проводили отмывки 3 × 5 мин. Промывает использованный раствор TBST для обнаружения хемилюминесценции и PBS с 0.1% Твин-20 (PBST) для инфракрасного обнаружения. При использовании инфракрасного обнаружения мы выполнили все этапы инкубации вторичных антител в темноте. Мембраны, обнаруживаемые с помощью хемилюминесценции, проявляли путем погружения в субстрат Luminata Classico Western HRP на 1 мин. Избыточный субстрат слили, и изображения сразу же были сняты на LAS-3000 или AI600. Мембраны для инфракрасного обнаружения сканировали на системе визуализации LI-COR Bioscience Odyssey CLx. Как влажные, так и сухие мембраны сканировали в Odyssey CLx.Репрезентативные изображения данных Вестерн-блоттинга и окрашивания Ponceau S, не показанные на основных рисунках результатов, представлены в дополнительных материалах (Дополнительные рисунки S2, S3, S4, S5, S6 и S8).

2.7. Программное обеспечение для захвата изображений и форматы изображений

Изображения, снятые с помощью системы LAS-3000, были получены в программе Fujifilm Image Read LAS-3000 версии 2.0 и сохранены в виде файлов raw.inf / .img. Изображения AI600 были получены в GE Imager версии 1.2.0 и сохранены в виде файлов TIFF. Вестерны, отсканированные с помощью Odyssey CLx, были визуализированы с помощью программного обеспечения LI-COR Image Studio версии 2.1.10 и изображения были сохранены как рабочая область. Все денситометрические анализы были выполнены на изображениях, сохраненных в указанных выше форматах. Изображения колориметрических красителей Ponceau S, а также вестерн-блотов, обнаруженных с помощью хемилюминесценции, которые были проанализированы как часть наборов данных, представленных на рисунках 1–4, были проанализированы с использованием программного обеспечения для анализа изображений MultiGauge версии 3.0. Примеры данных вестерн-блоттинга и данных по мечению общего белка Cy5, представленные на фиг. 5, были проанализированы с использованием программного обеспечения Image Quant TL версии 8.1. Все денситометрические анализы, выполненные на мембранах, сканированных на Odyssey CLx, были выполнены с использованием Image Studio Light версии 5.





2.8. Метод денситометрии

Во всех программных пакетах область интереса (ROI), окружающая каждую полосу, определялась вручную. Чтобы обеспечить захват всей полосы, значения в справочной таблице были скорректированы для увеличения контраста. Это не меняет базовые значения для количественной оценки. Все полосы с правильной молекулярной массой ± приблизительно 5 кДа анализировали как сигнал для этого целевого белка.В эту область были включены любые перекрывающиеся видимые полосы как на изображении вестерн-блоттинга, так и на электрофореграмме, чтобы гарантировать, что уровень вычитания фонового сигнала соответствует уровню фонового шума в мембране и не подвергается искусственному влиянию детектируемого сигнала. Поскольку сравнения проводятся с одним и тем же образцом лизата, любые неспецифические перекрывающиеся полосы, которые могут присутствовать в этой области, считаются имеющими постоянную относительную численность и вряд ли будут мешать интерпретации данных.Любые другие полосы, видимые при различных молекулярных массах, были исключены из анализа. Когда полосы на соседних дорожках соприкасались из-за высокой белковой нагрузки, границы области интереса помещались в точку минимальной толщины между полосами. Данные денситометрии для изображений общего окрашивания белков Ponceau S были получены для всех белков, видимых на каждой полосе. Все процессы нормализации данных были выполнены путем разделения O.D. значение целевого белка по O.D. значение выбранного контроля загрузки.

2.9. Анализ с использованием программного обеспечения MultiGauge

Изображения были проанализированы с помощью программного обеспечения MultiGauge с использованием автоматического горизонтального или многоугольного определения базовой линии с настройками отношения H 10% и отношения V 70%. Ширина полосы определялась вручную. Пределы полосы были выбраны как область на каждой стороне кривой (верх / низ полосы), в которой линия, обозначающая интенсивность, касалась или проходила параллельно линии, обозначающей базовую линию.

2.10. Анализ с использованием программного обеспечения Image Quant TL

Алгоритм катящегося шарика с радиусом 50 пикселей использовался для вычитания фона.Пределы каждой полосы белка были выбраны так, чтобы быть областью на каждой стороне кривой (верх / низ полосы), в которой линия, обозначающая интенсивность полосы, касалась линии, обозначающей базовую линию.

2.11. Анализ с использованием программного обеспечения Image Studio

При проведении денситометрии в Image Studio использовалась медианная локальная коррекция фона с шириной границы 1 единица. Местоположение области для коррекции фона было определено вокруг соседних пикселей области интереса с использованием только верхнего / нижнего, только правого / левого или всей настройки области интереса.Этот выбор был изменен, чтобы предотвратить подсчет (в качестве фона) сигнала от перекрытия между соседними дорожками, а также любыми нецелевыми полосами на расстоянии 5-10 кДа от молекулярной массы целевого белка, поскольку они, вероятно, будут мешать правильному вычитанию фона, если не будут учтены. После того, как граничная область была выбрана для вычитания фона, этот выбор сохранялся согласованным для всех повторов, анализирующих один и тот же белок.

2.12. Статистический анализ соответствия регрессии

Моделирование регрессии было выполнено с использованием GraphPad Prism версии 6.Все регрессионные модели были подобраны с использованием метода наименьших квадратов. Сравнение соответствия каждого набора данных моделями гиперболической и линейной регрессии проводилось с использованием F-критерия дополнительной суммы квадратов с пороговым значением F-статистики = 0,05 для выбора модели [38].

3. Результаты
3.1. О. Данные могут быть насыщенными при анализе вестерн-блотов при обычно используемых количествах белкового лизата

2-кратные серийные разведения объединенных лизатов ткани миометрия доношенной беременной человека разделяли с помощью SDS-PAGE и переносили на мембраны из нитроцеллюлозы или PVDF.Их зондировали антителом против αSMA и детектировали с помощью хемилюминесценции или инфракрасной флуоресценции (рис. 1). О. данные были проанализированы на предмет насыщения путем сравнения гиперболической модели с линейной моделью [4].

O.D. данные со всех мембран лучше соответствовали гиперболическим, чем линейным моделям, указывая на то, что данные становились насыщенными по мере увеличения количества лизата, загруженного в гели (Рисунки 1 (a) –1 (e)). Линейная область обнаружения находилась ниже примерно 0.3-1,25 мкг лизата. В линейной области обнаружения О. данные напрямую соответствуют содержанию белка только в том случае, если данные соответствуют прямо пропорциональным линейным моделям [2, 5]. Если линейный О. данные вместо этого соответствуют непропорциональным линейным моделям, О. данные не соответствуют напрямую содержанию белка, и если это не учитывать, любые оценки различий в содержании белка между образцами будут неверными [2, 5]. В этих вестерн-блоттингах О. данные выше приблизительно 0,3-1,25 мкг лизата были нелинейными и выходили на плато, когда было проанализировано более 5-20 мкг лизата.Это различалось в зависимости от типа использованной мембраны. Крючковидные эффекты высоких доз присутствовали в плато на всех мембранах, обнаруженных с помощью хемилюминесценции. Нелинейную, но не плато, область обнаружения следует использовать для количественной оценки только в том случае, если O.D. данные из выборок интерполируются относительно O.D. данные стандартной кривой, полученной из образца калибратора (лизата или очищенного белка), обрабатываются с учетом достаточного количества разведений, чтобы определить подходящую модель [2, 4, 5, 21, 25].Этот метод также можно использовать для оценки различий в содержании белка, когда О. данные линейны, но непропорциональны [2, 5]. Для контроля мембраноспецифических эффектов важно, чтобы серия разведений калибратора была включена на каждую мембрану, содержащую сравниваемые образцы [2, 4, 5, 21, 25], и O.D. данные, выходящие за пределы стандартной кривой, не следует анализировать [4, 20]. Только качественные сравнения, показывающие наличие или отсутствие белка / PTM, должны проводиться в области обнаружения, где O.Данные D. вышли на плато, потому что различия в содержании белка / PTM не могут быть обнаружены [3, 4, 8, 12, 13].

Визуальный осмотр Вестерн-блотов (рис. 1 (а)) показывает, что площадь полосы увеличивается с увеличением белковой нагрузки. Это говорит о том, что насыщение О. данные могут быть отнесены к измерению интенсивности полосы, и, следовательно, эта площадь полосы измерения сама по себе может обеспечить решение проблемы насыщения. Для блотов, обнаруженных с помощью хемилюминесценции, мы отдельно исследовали интенсивность полосы (дополнительный рисунок S1) и площадь полосы (дополнительный рисунок S1).Эти данные лучше всего подходят для гиперболических кривых, что указывает на то, что ни одна из этих мер сама по себе не решает проблему О. насыщенность данных.

3.2. Артефакты ореола полосы препятствуют точному количественному сравнению

На рисунке 1 (a) затухание полосы, известное как «двоение» [12, 21], можно увидеть над примерно 2,5 мкг лизата в нитроцеллюлозных мембранах и 10 мкг лизата в мембранах из ПВДФ. детектируется с помощью хемилюминесценции. Призраков не наблюдалось в мембранах, обнаруживаемых с помощью инфракрасной флуоресценции.Этот артефакт приводит к появлению размытых полос [4, 21] и вызывает вышеупомянутые крюкоподобные эффекты высоких доз в αSMA O.D. значения, которые были представлены на рисунках 1 (б) и 1 (г). Таким образом, вестерн-блоттинг, на котором видны полосы-призраки, непригоден для количественного сравнения, поскольку денситометрия не обеспечивает надежных измерений содержания белка [4, 21]. Поскольку "фантом" связан с переизбытком целевого белка, с этим следует бороться, уменьшая количество лизата, загружаемого в гели SDS-PAGE [4].

3.3. Каждый белок в образце может иметь разную линейность

Мы исследовали, влияет ли насыщение на линейность OD. данные для других белков миометрия (рис. 2). В рамках этого эксперимента мы также проверили, происходило ли насыщение в условиях эксперимента, отличных от тех, которые использовались для образцов, показанных на рисунке 1. Это было достигнуто при анализе образцов, показанных на рисунке 2, с использованием другого лизата ткани миометрия человека, другого Система SDS-PAGE, поставщик нитроцеллюлозной мембраны и системы обнаружения хемилюминесценции.

Каждый проанализированный белок имел различную линейность и / или обнаруживаемый диапазон в серии разведений (40–0,16 мкг лизата) (рис. 2). О. данные для αACTININ, αSMA, HSP27 и ERK1 / 2 зависели от насыщения, поскольку они соответствовали гиперболическим моделям. MYPT1 и MLC-20 O.D. данные не были затронуты насыщением, поскольку они соответствуют линейным моделям. ROCK1, Cofilin и GAPDH O.D. данные по крайней мере от одной мембраны на белок были согласованы с помощью гиперболических моделей, и по крайней мере одна мембрана для каждого белка была согласована с линейными моделями, что указывает на то, что подходящая модель регрессии может отличаться для мембран, содержащих повторы эксперимента.Эти различия между экспериментальными повторами могут не контролироваться исследователем и могут быть связаны с различиями в эффективности переноса, которые влияют на количество белков, присутствующих на этих мембранах. Обнаружение с помощью хемилюминесценции или инфракрасной флуоресценции дало лишь минимальные различия в моделях, которые соответствовали O.D. данные получены для того же белка.

3.4. Ваши нормализованные западные данные могут вводить в заблуждение

В другой серии экспериментов, в которых использовались серии разведений различных лизатов миометрия, каждую мембрану окрашивали Ponceau S для определения общего белка, а затем зондировали на MYPT1, αSMA и RhoA.Пропорциональные линейные модели не подходят для большинства MYPT1, αSMA и RhoA O.D. данные (дополнительный рисунок S7). Таким образом, мы смогли исследовать в реальных экспериментальных условиях, нарушается ли нормализация данных, когда О. данные отклоняются от пропорционально-линейных моделей (рисунок 3).

Когда мы нормализовали один из этих белков против другого белка (Рисунки 3 (a), 3 (b) и 3 (c)) или белка против пятна Ponceau S (Рисунки 3 (d), 3 (e), и 3 (f)), нормализованное соотношение не было постоянным, и оно систематически отличалось в каждой серии разведений способом, специфичным для исследуемых белков.Эти данные подтверждают, что нормализация ОП целевого белка нецелесообразна. данные, разделив их на O.D. данные о загрузке контрольных белков, если O.D. данные не соответствуют линейным пропорциональным моделям [2, 7, 20, 24].

3.5. О. Нелинейность данных и ошибка нормализации могут возникать в типичных условиях вестерн-блоттинга

Мы добавили в гомогенаты миометрия два очищенных рекомбинантных белка, ENPP1 (~ 97 кДа) и Fam3a (~ 23 кДа). Путем учета количества каждого рекомбинантного белка и использования лизата без добавок в качестве разбавителя мы смогли варьировать концентрации добавленных белков в серии серийных 2-кратных разведений, сохраняя при этом одинаковые общие количества (мас. / Об.) Лизата. .Эти образцы позволили нам оценить О. линейность данных и ошибка нормализации в условиях, подобных тому, как выполняется типичное сравнение Вестерн-блоттинга, в котором образцы сравниваются при единственном количестве лизата, которое поддерживается постоянным между сравнениями.

O.D. данные ENPP1 и Fam3a соответствовали гиперболическим моделям (рис. 4). Был только небольшой диапазон ENPP1 и Fam3a O.D. данные, которые были приблизительно линейными, что происходило ниже примерно 250 нг добавленного белка (<0.63% добавленных белков в общем лизате). В каждой пробной дорожке мы нормализовали ENPP1 до Fam3a и отдельно нормализовали ENPP1 и Fam3a до Ponceau S. данные (дополнительный рисунок S9). Когда ENPP1 был нормализован до Fam3a (это соотношение должно быть постоянным между образцами), была обнаружена небольшая ошибка нормализации примерно в 2 раза в серии разведений. Отель Ponceau S O.D. данные были аналогичными между дорожками (дополнительный рисунок S8), что было ожидаемо, потому что каждый образец содержал одинаковое количество лизата, загруженного в гель; следовательно, нормализация ENPP1 и Fam3a до Ponceau S была подобна разделению необработанных ENPP1 и Fam3a O.D. данные на константу, и нормализованные данные сохранили гиперболический паттерн необработанных данных. Если эти нормализованные данные (ENPP1: Ponceau S или Fam3a: Ponceau S) использовать для сравнения уровней белка ENPP1 или Fam3a между этими образцами, оцененные различия в содержании белка будут неверными. Все ошибки нормализации, наблюдаемые в этом наборе данных, были похожи по структуре и величине между мембранами, обнаруженными с помощью хемилюминесценции или инфракрасной флуоресценции.

3.6. Более точная оценка различий в содержании белка может быть сделана после калибровки экспериментов вестерн-блоттинга

На рис. 5 показан пример того, как количественное определение содержания белка с помощью вестерн-блоттинга O.D. данные могут быть успешно выполнены. Используя данные экспериментов на Рисунке 4 в качестве руководства, мы провели эксперимент, в котором мы сравнили в двух экземплярах два образца, которые имели 4-кратную разницу в количестве рекомбинантных белков ENPP1 и Fam3a. Абсолютные количества проанализированных рекомбинантных белков ENPP1 и Fam3a (12,5 нг в одном образце против 50 нг в другом) были рассчитаны так, чтобы они находились в пределах линейного диапазона обнаружения, и мы включили стандартную кривую, охватывающую диапазон 3.25–100 нг рекомбинантных ENPP1 и Fam3a добавлены в лизат миометрия. Сравнение общего содержания белка на мембране (использованного в качестве контроля нагрузки) показало, что оно не отличалось более чем примерно в 0,1 раза между сравниваемыми образцами (рис. 5 и дополнительная таблица S2). Это означало, что маловероятно, что смешивающие факторы повлияли на сравнения. Таким образом, было бы излишним ставить Вестерн-блот O.D. данные через процесс нормализации. О. данные для рекомбинантного ENPP1, измеренные в стандартах, соответствовали пропорциональному линейному уравнению (Рисунок 5) (уравнение y = 702615x, относительное R 2 = 0.993). Стандартная кривая полезна здесь в качестве проверки контроля качества, чтобы продемонстрировать, что O.D. данные соответствуют этому уравнению [2, 3, 7]. Однако в этой идеальной ситуации [2–5] стандартная кривая не улучшает оценки различий в содержании белка. Таким образом, было обнаружено 3,4-кратное различие в содержании рекомбинантного белка ENPP1 между двумя сравниваемыми образцами, когда сравнения проводились с использованием необработанного O.D. данные, а также когда сравнения были сделаны после O.D. данные были сначала интерполированы по стандартной кривой.Напротив, О. данные для Fam3a, измеренные в стандартах, лучше соответствовали непропорциональному линейному уравнению (Рисунок 5) (уравнение y = 318398x - 1411334, R 2 = 0,996), чем пропорциональному линейному уравнению (P = 0,0433, по сравнению с использованием экстра-суммы- квадратов F-тест). Между двумя образцами было обнаружено 5,9-кратное оценочное различие в содержании рекомбинантного Fam3a, когда исходный O.D. данные сравнивались. Как описано выше и подчеркивает важность стандартной кривой в этих случаях [2, 5], интерполяция Fam3a O.Данные D. относительно стандартной кривой до проведения сравнений привели к более точной 3,9-кратной разнице в содержании рекомбинантного Fam3a.

4. Обсуждение

Наше исследование подтверждает, что количественная оценка данных вестерн-блоттинга не является простой задачей [2–4, 20]; пользователи не могут произвольно выбирать количество лизата для загрузки в гель и ожидать значимых результатов, даже если загрузка белка поддерживается постоянной на всех полосах геля.

Воспроизводимость, чувствительность обнаружения, линейность и пропорциональность данных, а также динамический диапазон обнаружения являются важными параметрами для оценки любого метода вестерн-блоттинга [2, 3, 20].Когда мы сравнили эти параметры между детектированием с помощью хемилюминесценции или инфракрасной флуоресценции, мы не обнаружили различий, которые были бы достаточно большими, чтобы рекомендовать использование одного метода над другим. Хотя это противоречит некоторым недавним исследованиям, которые предположили, что обнаружение с использованием инфракрасной флуоресценции дает превосходные количественные данные вестерн-блоттинга [4, 18], наши результаты подтверждают, что более полезно признать, что существуют ограничения при сборе и анализе всех вестерн-блоттинг данные вне зависимости от метода обнаружения [3].Таким образом, только при наличии надлежащих стратегий контроля качества можно полагаться на то, что интерпретация количественных данных вестерн-блоттинга будет иметь биологическое значение [2–5, 7, 11, 20, 21, 25].

Очень важно решить проблему насыщения, не зависящего от детектора, которое влияет на линейность вестерн-блоттинга. данные, чтобы гарантировать получение значимых результатов [2–21]. Было предложено множество объяснений этого типа насыщения, в том числе то, что оно может быть связано с: (1) насыщением участков связывания мембраны [5, 11, 12], после чего белки будут связываться слоями, которые скрывают обнаружение белков, расположенных слоями под ними. [11]; (2) ограниченная доступность красителей, антител и / или антигенов [4, 12]; (3) концентрация используемых первичных или вторичных антител [6, 25]; (4) ограничения локальной концентрации Субстрат HRP [25], (5) окисление HRP, присоединенного к вторичным антителам [4, 20], (6) тушение близости инфракрасной флуоресценции [4].

Независимо от причины насыщения, наша работа и работа других [2–21, 25] показывают, что не следует предполагать, что О.Д. данные обеспечивают прямое измерение содержания белка [2, 4, 5, 7]. Не следует предполагать линейную пропорциональность, даже если она основана на аналогичных исследованиях, поскольку различия в методологии, которые кажутся незначительными, влияют на линейность ОП. данные [4, 25]. Следовательно, чтобы обеспечить правильную интерпретацию данных и повысить уверенность в точности и воспроизводимости результатов, подходящая модель для О.D. данные должны быть собраны и представлены для каждого анализируемого белка в каждом исследовании [2, 3, 7, 11, 12, 20, 39]. Эта оценка должна выполняться в условиях, идентичных условиям, используемым для анализа экспериментальных образцов, и также важно, чтобы уровни всех исследуемых белков были одинаковыми в лизате, используемом для этой оценки, и в экспериментальных образцах [3, 7, 11, 12 , 20]. Это может быть выполнено с использованием серии разведений объединенного лизата из всех экспериментальных образцов [3, 7, 11, 12, 20, 39]; однако, поскольку этот метод усредняет уровни белка между образцами, необходимо обеспечить, чтобы анализ проводился с интервалом разбавления, достаточным для охвата всех количеств белка, которые могут встречаться в исследовании [11, 39].

O.D. данные обычно нелинейны и часто выходят на плато, когда белки с высоким содержанием (часто «домашние» белки, такие как GAPDH, α-тубулин и β-актин) обнаруживаются выше 1–10 мкг лизата [2–21]. Наши результаты, показывающие, что αSMA и HSP27 O.D. данные были нелинейными, когда было проанализировано более чем приблизительно 1,25 мкг лизата ткани миометрия человека, что еще больше ставит под сомнение надежность исследований вестерн-блоттинга, в которых в качестве контроля загрузки использовались другие белки с высоким содержанием. Стоит повторить, что известно, что GAPDH, α-тубулин и β-актин часто не подходят для контроля нагрузки, поскольку их уровни меняются в различных биологических и экспериментальных условиях на уровне мРНК и / или белка [7, 18, 40 –45].Эти изменения численности могут быть связаны с биологическими различиями in vivo [18], могут быть вызваны исследуемыми экспериментальными методами лечения [7, 41] или могут быть связаны с биологией in vitro экспериментальных моделей [43]. Уровни специфических белков клеточного типа, которые используются в качестве контроля загрузки, также могут изменяться в различных экспериментальных условиях. Например, Кэмпбелл и др. [45] обнаружили, что уровни мРНК αSMA изменяются в зависимости от плотности клеток в первично культивируемых клетках гладких мышц аорты кролика.Следовательно, необходимо подтвердить, что уровни белка (белков) контроля нагрузки не изменяются между сравниваемыми экспериментальными популяциями, или, если это доказательство уже было опубликовано, на него следует ссылаться [2].

Мы подтвердили, что когда О. данные отклоняются от пропорционально-линейных моделей, достоверность нормализации выполняется путем деления целевого белка О.Д. данные с загрузкой контрольного белка O.D. данные скомпрометированы [2, 7, 20, 24]. Наши и другие данные [7, 24] показывают, что нормализация, выполняемая в этих условиях, не учитывает несущественные различия в содержании белка / PTM, независимо от того, вызваны ли они биологическими факторами или техническими артефактами.В лучшем случае это добавит дисперсии к оценкам содержания белка / PTM [12] и приведет к завышенной или заниженной оценке величины изменений содержания белка / PTM [2, 4, 5, 7, 24], а в худшем - может давать нормализованные отношения, которые предполагают, что содержание протеина / PTM отличается в противоположном направлении от того, что на самом деле происходит в анализируемых образцах. Следовательно, на нормализованные данные, полученные в этих условиях, нельзя полагаться, и их следует интерпретировать с осторожностью, поскольку это может привести к неправильным выводам [2, 20].Количественно установить, когда О.Д. данные достаточно отклоняются от пропорциональных линейных моделей, чтобы сделать эту стратегию нормализации непригодной. Следовательно, мы предлагаем, чтобы всякий раз, когда используется этот метод нормализации (когда данные O.D. аппроксимируются пропорциональными линейными моделями), исследователь должен продемонстрировать, что ошибка нормализации не может объяснить его результаты, и данные, использованные для достижения этого заключения, должны быть показаны. В ситуациях, когда непропорциональный внешний диаметр сигналы обнаруживаются, и данные из интересующего белка должны быть нормализованы к одному или нескольким элементам управления нагрузкой, непропорциональность должна быть учтена, что может быть достигнуто с использованием альтернативных стратегий нормализации [24] или путем интерполяции данные по стандартным кривым [2, 4, 5, 21, 25].

Методы мечения общего белка обычно рекомендуются в литературе [2, 3, 7–10, 12, 13, 15, 17, 18, 20, 22, 25, 39]. Эти методы включают технологию без окрашивания, которая маркирует белки в геле, который впоследствии используется для вестерн-переноса [2, 8, 9, 39], и красители, такие как Ponceau S, которые маркируют белки, связанные с вестерн-мембранами [8, 15, 25] . Мечение общего белка может быть подходящим контролем нагрузки и O.D. данные, полученные в результате мечения общего белка, часто остаются линейными при нагрузках лизата более 5-10 мкг белка [2, 7–9, 12, 15, 17, 18, 20, 25, 39].Важно учитывать, мешает ли маркировка общего белка последующей иммунодетекции [9, 17]; однако это встречается редко [10] и легко проверяется путем сравнения одновременно визуализированных вестерн-блотов, содержащих идентичные образцы, в которых мечение общего белка проводилось для одной мембраны, а не для другой [7, 10, 12]. Если не было доказано, что мечение общего белка мешает иммунодетекции, есть две важные причины, по которым каждая мембрана вестерн-блоттинга должна быть помечена на общий белок, и эти данные должны представляться даже при загрузке контрольных белков, также обнаруживаемых с помощью антител: (1) Большинство типы белков, обнаруженных в лизатах клеток и тканей, визуализируются с помощью методов мечения общего белка, и, следовательно, эти методы позволяют оценивать уровни экспрессии многих различных белков [9, 10, 15, 20].Напротив, иммунодетекция специфических белков, контролирующих загрузку, в настоящее время является слишком ресурсоемкой, чтобы позволить рутинное обнаружение более чем нескольких белков на каждой мембране; таким образом, иммунодетекция имеет больше шансов на ошибку выборки [9, 10, 15, 20]. Представление данных мечения общего белка часто позволяет другим исследователям наилучшим образом ответить на вопросы о том, имеют ли разные образцы сходные профили разделения белков SDS-PAGE и, когда это уместно, одинаково ли количество общего белка, проанализированного для каждого образца [9, 10, 15 , 20].(2) Полное мечение белков западных мембран лучше всего показывает артефакты, такие как деградированные образцы, смазанные полосы из-за осаждения белка в геле и ошибки переноса, такие как пузырьки воздуха [7, 25].

Также важно понимать, что маркировка всех белков в образце не делает различий между источниками белка, когда присутствует более одного биологического источника [3]. Следовательно, даже если в образцах обнаруживается одинаковое количество общего белка, это может происходить из-за различий в типах клеток и / или внеклеточном матриксе, и если эти различия не имеют отношения к решаемому экспериментальному вопросу, это может привести к неверным результатам [3 ].Хотя такое же ограничение применяется к повсеместно экспрессируемым белкам контроля загрузки, обнаруживаемым с помощью антител, это иногда можно обойти при исследовании тканеспецифического белка, используя белок контроля нагрузки, специфически экспрессируемый в той же ткани, что и целевой белок [3]. Чтобы показать, что различия в составе ткани не влияют на результаты вестерн-блоттинга при использовании мечения общего белка или повсеместно экспрессируемых белков контроля нагрузки, следует также выполнить гистологический анализ или процитировать соответствующую литературу [3].

5. Выводы

Мы показали, что существует множество технических проблем, которые необходимо преодолеть при использовании вестерн-блоттинга для сравнения количества белков, обнаруженных в лизатах ткани миометрия. Наши данные подтверждают литературные данные и подтверждают, что трудно преобразовать вестерн-блоттинг из качественной методики в количественную [2–4, 7, 11, 20]. Анализируя белки миометрия, включая αSMA, HSP27, αActinin и GAPDH, мы подтвердили, что загрузка слишком большого количества лизата в гель SDS-PAGE может вызвать такие проблемы, как независимые от детектора O.D. насыщенность данных, нелинейность О. данных и артефактов-фантомов в последующих экспериментах по вестерн-блоттингу [2–4, 7, 11, 20]. Эти проблемы усугубляются тем ограничением, что стандартный метод нормализации данных, который используется в полевых условиях, работает только тогда, когда O.D. данные, используемые в расчетах нормализации, прямо пропорциональны содержанию соответствующих белков в исследуемых образцах [4–6, 24]. Наши данные подтвердили, что, когда это не так, смешанные различия в содержании белка, обусловленные техническим или биологическим происхождением, не могут быть учтены в нормализованных данных.В заключение, наши результаты, взятые вместе с данными из литературы [2–4, 7, 11, 20], предполагают, что большая часть данных вестерн-блоттинга, регулярно публикуемых в научном сообществе, вероятно, будет серьезно скомпрометирована и несправедливо используется для подтверждения заявлений о биологическом значении. Ниже мы сделали общие рекомендации, основанные на литературных [2–4, 7, 11, 12, 20, 25, 39]. Использование этих или подобных рекомендаций научным сообществом приведет к гораздо более высокому стандарту качества сообщаемых данных вестерн-блоттинга.

Рекомендации (1) Выполните маркировку общего белка и визуализируйте меченые мембраны. Представьте эти изображения вместе со всеми данными вестерн-блоттинга или в дополнительном материале. (2) Денситометрический анализ не следует проводить на полосах, показывающих двоение, поскольку он ненадежен и может привести к неправильной интерпретации данных. (3) Деградированные образцы показывают размытие полос, перегруженные дорожки с полосы с полосами из-за осаждения белка в геле или полосы с волнистым рисунком, указывающим на перегрев гелей, не должны использоваться для количественных сравнений.(4) Выполнение анализов вестерн-блоттингом, специально разработанных для установления динамического диапазона обнаружения и определения того, соответствуют ли данные OD пропорционально линейным, линейным, но непропорциональным или нелинейным моделям для всех оцениваемых белков-мишеней / PTM, а также все средства управления загрузкой. Эта критическая оценка должна выполняться в тех же технических условиях и условиях выборки, что и те, которые в конечном итоге будут использоваться в исследовании. В идеале это повторяется как минимум на двух мембранах, чтобы свести к минимуму вероятность того, что мембранно-специфические эффекты помешают этому важному этапу проверки.(5) Загрузите экспериментально обоснованное количество лизата. Это количество должно основываться на калибровках, выполненных на шаге (4). Количественные сравнения не следует проводить в насыщенном диапазоне белковой нагрузки. Если О. данные соответствуют линейным, но непропорциональным или нелинейным моделям, это следует учитывать во всех количественных сравнениях. (6) Вестерн-блоттинг на проверенных неизменных контрольных образцах нагрузки следует проводить в оптимизированных ненасыщенных условиях. Это может потребовать, чтобы образцы, исследующие контроль (ы) загрузки, были запущены при различных разведениях на разных дорожках и / или мембранах для целевых белков.(7) Предоставьте доказательства того, что шаги нормализации данных работают по своему прямому назначению и не вносят ошибок в анализ. (8) Используйте соответствующие статистические анализы и стратегии статистической блокировки, которые учитывают меж- и внутримембранные различия.

Доступность данных

Все данные денситометрии и репрезентативные изображения вестерн-блотов и мембран, помеченных пятнами общего белка, которые использовались для подтверждения результатов этого исследования, включены в дополнительные материалы.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что нет никаких конфликтов интересов, которые могли бы повлиять на это исследование.

Выражение признательности

Это исследование финансировалось Австралийской программой стипендий для аспирантов и программой подготовки научных кадров, предоставленной Университетом Ньюкасла, Ньюкасл, Австралия. Авторы хотели бы поблагодарить Энн Райт за набор пациентов, персонал больницы Джона Хантера и матерей, которые щедро согласились на эти исследования.

Дополнительные материалы

Дополнительные 1. Дополнительная таблица S1: этот файл содержит подробную информацию об антителах, использованных в этом исследовании, включая сведения о поставщиках, каталог и номера партий, разведение каждого использованного антитела, условия блокировки мембраны и условия инкубации антител.

Дополнительный 2. Дополнительные рисунки S1-S9: Этот файл содержит репрезентативные изображения данных вестерн-блоттинга и окрашивания Ponceau S мембран, на которых была проведена денситометрия.Он также содержит вспомогательные данные денситометрии и / или нормализованные данные вестерн-блоттинга, которые использовались в основных рисунках.

Дополнительный 3. Дополнительная таблица S2: этот файл содержит необработанные данные денситометрии и нормализованные данные, которые использовались в этом исследовании.

Часто задаваемые вопросы

Щелкните по ссылкам, чтобы найти ответы на вопросы

Машинная стирка и чистка

Конденсация: во время интенсивной работы, когда внутри одежды высокие относительная влажность и температура, на внутренней стороне мембраны образуется конденсат.В результате внутри одежды может образоваться достаточно воды, чтобы убедить пользователя, что мембрана или покрытие протекает.

Пониженная воздухопроницаемость: вода в ткани рядом с мембраной / покрытием значительно снижает скорость, с которой влага тела может проходить через мембрану в наружный воздух.

Увеличенная масса одежды: пропитанные верхние ткани добавляют ей веса. Конденсат внутри одежды способствует заметному увеличению веса, особенно в одежде с влагоотводящей подкладкой.

Обычные моющие средства оставляют водоотталкивающие остатки на вашей верхней одежде, поэтому всегда используйте соответствующее чистящее средство Nikwax (Tech Wash или Down Wash) для очистки вашей верхней одежды. Очистители Nikwax мягко удаляют грязь и загрязнения, не повреждая оригинальный DWR (стойкое водоотталкивающее свойство) производителя.
Если ваша одежда очень грязная, на ней есть масляные пятна (и т. Д.), Вы можете использовать моющее средство для удаления пятен, но затем вы должны удалить остатки моющего средства с ткани с помощью Tech Wash и повторно сделать водостойким с помощью соответствующего водоотталкивающего средства Nikwax, чтобы добавить водоотталкивающие свойства.

Нет. Продукты Nikwax были протестированы ведущими производителями, и стиральным машинам или их компонентам никогда не было причинено никакого вреда или повреждений. Nikwax безопасен для септиков и других дренажных систем, не подключенных к сети.

Долговечная водоотталкивающая способность (DWR)

Durable Water Repellency (DWR) - это невидимое водоотталкивающее покрытие, наносимое на внешнюю ткань большей части верхней одежды и оборудования. Он предотвращает впитывание воды тканью, заставляя воду скатываться по поверхности и скатываться.Уход за DWR одним из наших чистящих средств жизненно важен, чтобы ткань могла дышать.

Большинство водонепроницаемых дышащих курток можно стирать в стиральной машине, но всегда сначала читайте этикетку по уходу. Nikwax поддерживает использование машинной стирки со своими продуктами, чтобы обеспечить быстрое, эффективное и равномерное нанесение.

Многие люди думают, что их куртка или снаряжение протекает, когда проблема часто возникает из-за конденсации пота из-за того, что куртка не дышит должным образом.Это может быть связано с тем, что покрытие DWR изношено или замаскировано грязью, что может вызвать «намокание» ткани. Nikwax рекомендует чистить с помощью Tech Wash, а затем использовать соответствующие гидроизоляционные продукты, чтобы восстановить водоотталкивающие свойства и добиться максимальной эффективности вашего снаряжения. С Nikwax нет необходимости сушить в стиральной машине, чтобы активировать водоотталкивающие свойства.

Воздухопроницаемость и отвод воды

Чем больше вы тренируетесь, тем горячее вам становится и тем больше вы потеете.Когда пот испаряется, он охлаждает вас. Дышащая одежда позволяет испарениям пота выходить, обеспечивая вам комфорт. Если пары пота скапливаются на вашей одежде, она станет влажной. Когда вы прекращаете тренировку, влажная одежда отводит тепло, заставляя ваше тело очень быстро остывать. Это может быть опасно в холодную погоду. Важно поддерживать воздухопроницаемость верхней одежды.

Отвод пота от кожи.Любая влага, которая быстро испаряется и удаляется от кожи, сохранит вам прохладу и комфорт. Технически существует множество различных типов впитывающих тканей на выбор.

Продукты Nikwax

Погружая одежду в стирку, вы наносите полное и равномерное покрытие активных ингредиентов на все волокна, молнии и нити. Обработка распространяется на заднюю часть застежек-молний и клапанов карманов, за застежки-липучки - все те места, которые легко пропустить с помощью спрея.Вы не пропустите ни одной детали. Одежду с полиуретановым покрытием можно покрыть гидроизоляцией Nikwax с помощью нашего продукта TX.Direct, который наносится только на внешнюю сторону одежды. Этот продукт означает, что вы можете работать с конкретными участками куртки, требующими водонепроницаемости, в любое время и в любом месте.

Как и все другие средства для отдыха, работы или занятий спортом, средства Nikwax Waterproofing могут немного затемнить светлые или необычные по цвету кожу или ткань. Однако наш ассортимент обуви специально разработан, чтобы свести к минимуму любые изменения цвета или текстуры кожи или ткани.Водонепроницаемая защита с минимальным визуальным изменением намного лучше, чем обесцвечивание, окрашивание и образование водяных пятен на необработанной обуви.

Нет. Обработка Nikwax не меняет цвет, текстуру или ощущение одежды или спальных мешков. Даже для кожаной одежды безопасно использовать средства Nikwax для улучшения водонепроницаемости кожи без ухудшения воздухопроницаемости, поскольку они не содержат агрессивных растворителей, которые могут повредить гидроизоляцию, нанесенную на кожевенном заводе.

Да.Иногда при доставке, а также изменения температуры способствуют застыванию раствора, особенно если продукт не использовался в течение длительного времени. Просто энергично встряхните, чтобы раствор снова диспергировался и примените.

Редко. Если у вас очень жесткая вода, используйте дополнительный колпачок очистителя Nikwax, чтобы предотвратить образование белого осадка кальция в жесткой воде.

Мы рекомендуем не допускать замерзания продуктов Nikwax.Храните под кухонной раковиной или в прохладном сухом месте, а не на улице. Если вы позволите вашему продукту замерзнуть, мы посоветуем вам не использовать его и утилизировать.

Хотя в продуктах Nikwax есть вода, она испаряется, оставляя водоотталкивающие свойства. Например, применение UV Proof дает выигрыш от 1 до 4% в зависимости от типа ткани, состояния ткани и того, насколько она уже водоотталкивающая. В качестве примера - Pertex прибавляет в весе менее 2%.Это, конечно, значительно меньше, чем количество воды, которое впитала бы ткань, если бы она не была водоотталкивающей.

Установление фактов

Процедуры Nikwax очень эффективны и долговечны. Правильно обработанные вещи (предварительно вымытые с помощью Nikwax Tech Wash, а затем обработанные соответствующим средством для пробивки Nikwax, например Nikwax TX.Direct) выдерживают от 4 до 6 стирок с использованием Tech Wash. При среднем использовании верхней одежды мы рекомендуем стирать и проверяйте свое снаряжение не реже одного раза в год.

Да. Мы настоятельно рекомендуем использовать Nikwax Tech Wash или одно из других наших чистящих средств в качестве предварительной стирки для удаления грязи и любых остатков моющих средств, которые могут препятствовать надежному сцеплению гидроизоляционных полимеров с волокнами ткани. Это помогает максимизировать эффективность и долговечность гидроизоляционных покрытий. Последнее, что вам нужно, - это водонепроницаемость над грязью!

Желательно проверить шовную ленту, если она доступна. Если вы заметили незакрепленные швы ленты, мы рекомендуем профессионально перемотать, почистить и подкорректировать их у производителя одежды.Или вы можете аккуратно приклеить их с помощью прозрачного клея, такого как Bostick, а затем очистить при нежной ручной стирке с помощью Nikwax Tech Wash, а затем нанести вручную TX.Direct смыв или спрей. Сушка на воздухе оживит одежду.

В нашем ассортименте обуви используются аппликаторы для губки

. Для всей нашей обуви, особенно из нубука и замши, необходимо сначала намочить обувь под проточной водой, нанести гель для очистки обуви, если он загрязнен, а затем сполоснуть.Если требуется расстойка, используйте соответствующий продукт Nikwax. Всегда наносите осторожно - не нужно сильно давить на обувь. Или попробуйте наши спреи для обработки нубука, замши, а также комбинированной обуви из ткани и кожи.

Предотвращая накопление запаха тела и рост микробов в ткани.

Сушка в барабане

Мы создали продукты, которые не нуждаются в нагревании для установления связи между гидроизоляционным полимером и тканью.Да, это правда. Использование продуктов Nikwax обеспечивает такой же, если не лучший стандарт водоотталкивающих свойств, чем продукты конкурентов, без использования тепла. В отличие от фторуглерода, Nikwax можно просто сушить на воздухе, что избавляет от необходимости проходить дополнительный этап нагрева, чтобы сделать ваше снаряжение водоотталкивающим!

Нет. Все процедуры обработки Nikwax превосходны при сушке на воздухе.

Окружающая среда

На стороне всех продуктов Nikwax WaterBased есть заявление, которое гласит: «Нет пропеллентов, нестойких, экологически безопасных.Не тестировался на животных. Не содержит фторуглеродов ».
Nikwax твердо придерживается принципа производства безопасных продуктов и, по возможности, не будет использовать компоненты, опасные для здоровья или окружающей среды.

Это означает, что мы используем воду для «переноса» гидроизоляционных ингредиентов в продукт. Везде, где вода может попасть на вашу обувь или одежду, то же самое может сделать и гидроизоляция, т.е. он нацелен на утечки. Это позволяет гидроизолирующему составу TX.10i обволакивать отдельные волокна в материале, обеспечивая водоотталкивающую отделку.Использование воды также означает, что мы не используем вредные химические растворители. Наши продукты полностью безопасны для пользователя и окружающей среды. Продукты на водной основе гораздо более концентрированные, чем другие, поэтому за свои деньги вы получаете большую гидроизоляцию. Продукты на водной основе ЛЕГЧЕ в использовании, они БЕЗОПАСНЫ в использовании и сохраняют ОСУШЕНИЕ.

Nikwax впервые начал изучать фторуглероды много лет назад. Мы продолжаем тестировать фторполимеры в лаборатории, потому что они действительно обладают желаемыми качествами, такими как маслоотталкивающие свойства.Однако продукты по уходу из фторполимеров конкурентов оказались уязвимыми к истиранию и давлению.
За последние 4 года появились доказательства того, что компоненты и потенциальные продукты распада фторполимеров обладают высокой стойкостью в окружающей среде и в тканях человека. Было также доказано, что эти химические вещества вызывают рак у крыс в очень низких концентрациях. Nikwax считает, что использование таких продуктов в домашних условиях представляет собой неприемлемый риск и что существуют более безопасные способы достижения прочных водоотталкивающих свойств.Для получения дополнительной информации перейдите по этой ссылке: Фторуглероды (ПФУ)

Несмотря на то, что некоторые производители заявляют, что их продукция является экологически чистой, используемые пропелленты по-прежнему являются мощными парниковыми газами и способствуют глобальному потеплению. Используемые растворители легко воспламеняются и будут способствовать образованию парниковых газов. Более 90% того, что пользователь покупает внутри аэрозольного баллона, испаряется в атмосферу и не оказывает положительного воздействия на повышение водоотталкивающих свойств.Напротив, продукты Nikwax на водной основе содержат гораздо более высокие концентрации гидроизоляционных веществ (до 35%), что означает меньшее количество применений, меньшее количество отходов и значительно меньший вред для окружающей среды. Мы также стремимся улучшить возможности повторного использования нашей упаковки, чтобы уменьшить количество отходов.

Стандартного определения наночастицы не существует. Однако одна общепринятая мера следующая:

«Частица, имеющая один или несколько размеров порядка 100 нанометров или меньше».Нанометр - это одна миллиардная метра.

Наночастицы повсюду. Когда вы чувствуете запах брызг океана, вы вдыхаете наночастицы. Глина состоит из наночастиц. Чашка кофе содержит наночастицы.

Беспокойство вызывают «новые» наночастицы. Это синтезированные или произведенные материалы, которые ранее не встречались в природе. Примером могут служить углеродные нанотрубки. Особое беспокойство вызывает распространение таких частиц в воздухе или воде, что может привести к их попаданию в организм человека с непредсказуемыми результатами.

Распылители на основе растворителя с пропеллентом могут образовывать переносимые по воздуху наночастицы, потому что образуется очень мелкий туман. При испарении растворителя в воздухе частицы тумана становятся еще меньше. Активные ингредиенты, доставляемые с помощью спреев на основе растворителей, могут быть диспергированы в виде наночастиц, достаточно мелких, чтобы проходить через дыхательные пути в легкие.

Жидкие полимерные дисперсии, которые являются полупрозрачными, то есть прозрачными, также содержат наночастицы. Таким образом, активные ингредиенты в полупрозрачных фторуглеродных жидкостях на водной основе в основном присутствуют в виде наночастиц.

Потребительские товары на водной основе Nikwax представляют собой белые непрозрачные жидкости со средним размером частиц обычно от 1 до 2 микрон. Это в десять раз больше, чем самая большая наночастица. Однако небольшая часть эмульсии будет находиться в нанодиапазоне. Как только Nikwax разбавляется водой или вода из него испаряется, частицы эмульсии объединяются, то есть соединяются вместе и увеличиваются в размерах. Таким образом, с продуктами Nikwax существует чрезвычайно низкий риск того, что новые наночастицы будут диспергированы в воде. или воздух за счет их использования.

Спреи на водной основе Nikwax выпускаются из спрея с спусковым крючком и не работают на газе. Следовательно, размер частиц, диспергированных в воздухе, относительно очень велик по сравнению с аэрозолем, управляемым газом-вытеснителем, и не является размером наночастиц. Поэтому спреи Nikwax с триггером представляют собой низкий риск вдыхания и возможность попадания материалов через дыхательные пути в легкие. Однако мы всегда должны проявлять осторожность, чтобы избежать вдыхания любого распыляемого материала, включая Nikwax.

Как мировой лидер в области ухода за окружающей средой на открытом воздухе, Nikwax предпочитает продвигать свои проверенные отличные экологические качества и высокие технические характеристики.

Nikwax остается единственной компанией по уходу за снаряжением на открытом воздухе, чей ассортимент гидроизоляционных продуктов полностью на водной основе, негорючий и не содержит фторуглеродов. Nikwax никогда не производил аэрозоли и никогда не продавал фторуглероды.

Значение сертификата Blue Sign для последующего ухода не определено; продукты по уходу, рекламируемые как Blue Sign, могут содержать фторуглероды или растворители или могут быть легковоспламеняющимися.

как стирать мембранную одежду

Одежда из мембранной ткани - настоящее чудо текстильной индустрии. Особая структура материала обладает ветрозащитными и водоотталкивающими свойствами. Предотвращая попадание холодного воздуха извне, материал беспрепятственно пропускает через себя пары с поверхности тела человека. Таким образом, одновременно защищая от переохлаждения и перегрева. Обладая такими уникальными свойствами, одежда из мембранных материалов стоит недешево, и такая одежда требует особого ухода.В этой статье мы рассмотрим, как стирать мембранную одежду в стиральной машине и как за ней ухаживать, чтобы ваши вещи прослужили долго, сохранив все необходимые свойства.

В 90-е годы мембранная одежда была доступна только профессионалам зимних видов спорта. Сегодня в магазинах можно найти самые разные этой инновационной одежды: для рядовых покупателей стали доступны куртка, комбинезон, зимний костюм на основе мембранной ткани.

Чтобы понять, как правильно стирать различную мембранную одежду, и можно ли стирать вещь в стиральной машине, в первую очередь обратитесь к этикетке на задней стороне изделия, где подробно описан уход за изделием. .На этикетке производители указывают, каким образом следует осуществлять стирку мембранной одежды - можно ли ее стирать в стиральной машине, или разрешена только ручная стирка. Производители также указывают, при какой температуре необходимо стирать одежду.

Считается, что мембрану можно стирать только вручную. Но, с развитием технологий и появлением деликатных режимов стирки появилась возможность стирать вещи в автоматическом режиме. Большинство стиральных машин наделены функцией щадящей ручной стирки, поэтому можно с уверенностью сказать, что сегодня стирку вещей из мембранных тканей можно осуществлять в стиральной машине.Для безопасной стирки просто выберите разрешающий режим.

Выбрать режим стирки

При выборе режима стирки в первую очередь следует руководствоваться данными на этикетке. Как правило, самый оптимальный вариант - это режим деликатной стирки при температуре 30-40 ° С, всегда без отжима. Мембранные вещи желательно стирать отдельно от обычных. Перед стиркой мембранных курток или других вещей с замками убедитесь, что замки застегнуты.

  • Запрещается стирать вещи с мембраны в режиме экспресс-программы с интенсивным отжимом.
  • Стирать при высоких температурах.
  • Постирайте мембранный трикотаж с изделиями из других материалов в набивной машине.
  • Оставьте вещь в стиральной машине в сыром виде. Сразу после стирки одежду следует снять и расправить, чтобы изделие не помялось.

Пористая структура материала имеет свойство быстро забиваться, что отрицательно сказывается на функциях воздухопроницаемости. Именно поэтому мембранные вещи следует стирать немного чаще, чем вещи из обычных материалов.

Выбор моющего средства

Перед тем, как приступить к стирке, следует учесть, что не все изделия подходят для таких изделий. Привычные средства ухода могут навредить уникальным свойствам материала.

  • Обычный стиральный порошок. Он забьет пористую структуру ткани, мембрана перестанет дышать.
  • Хлорсодержащие средства (отбеливатели и пятновыводители). Химический состав моющего средства отрицательно сказывается на водоотталкивающих свойствах материала.
  • Кондиционеры и кондиционеры. Уменьшают воздухопроницаемость материала.

Химический состав обычных моющих средств может повредить мембранную ткань. В ассортименте спортивных магазинов есть специальные шампуни и жидкие присыпки для ухода за одеждой из мембранного материала. Лучше всего использовать эти инструменты. В них можно стирать любую одежду из мембранной ткани, а также стирать мембранную обувь. Все они, как правило, жидкие и не справляются с сильными загрязнениями, как при стирке обычным порошком.

В случае сильного загрязнения пятна можно предварительно вымыть с мылом, а затем промыть в стиральной машине со специальным шампунем или жидким порошком. Например, в случае жирных пятен на куртке, вы можете смочить пятно в мыльной воде перед стиркой мембранной куртки в машине. Это будет намного эффективнее, чем стирка мембранной куртки сразу в стиральной машине, жидкий порошок может не полностью удалить пятна.


Как сушить мембранную одежду

Намочив постиранную вещь, необходимо, прежде всего, дать ей стечь.Допускается предварительно выдавить вещь, стараясь не допускать сильного перекручивания. Затем встряхните вещь, чтобы расправить все складки. Одежду желательно повесить на плечики и разместить над ванной. В ванной комнате подходящая температура, позволяющая высохнуть изделию, не повреждая структуру материала. Полноценную сушку в вертикальном виде проводить нежелательно, так как одежда может растягиваться, особенно это касается тяжелых объемных вещей, например зимних комбинезонов. Поэтому, когда вода перестанет стекать, следует разложить выстиранный комбинезон на ровной горизонтальной поверхности, предварительно положив туда махровое полотенце и просушив комбинезон в расправленном виде.

Противопоказано в процессе сушки:

  • Мембранные предметы нельзя сушить на батарее. Сильный нагрев может разрушить тонкий слой мембранной пленки.
  • Не сушить под прямыми солнечными лучами. На ткани могут образоваться обожженные пятна.
  • Сушка в вертикальном положении противопоказана. Изделие может растягиваться под собственным весом, нарушая структуру материала.

Дополнительный уход и хранение

Ни в коем случае нельзя гладить мембранные изделия. Высокие температуры отрицательно влияют на структуру материала. Если одежда после стирки выглядит слишком помятой и ее нужно гладить, то с такой вещью лучше обратиться в химчистку. После химчистки на мембранной одежде не образуются складки и их не нужно гладить.

Следует отметить, что после стирки вещи из мембранной ткани требуют особого ухода. Существуют специальные спреи и аэрозоли для пропитки одежды, которые поддерживают водоотталкивающие и дышащие свойства материала.Наносить такие продукты необходимо, пропитав их чистым и сухим средством.

Чистую и хорошо просушенную одежду необходимо хранить в сухом месте. Пыль быстро забивает поры мембранного материала, поэтому желательно завернуть вещь в полиэтиленовый пакет и поместить в темный шкаф. При хранении следует избегать сырых помещений, а также попадания прямых солнечных лучей на продукт.

Мембранная одежда - одно из последних достижений текстильной промышленности, ставшее очень популярным.Эта ткань состоит из волокон, покрытых пористой полимерной пленкой, не пропускающей даже воду. Мембрана обладает уникальными свойствами, защищающими от замерзания и перегрева: она не дает проникать влаге извне и в то же время позволяет поту испаряться с поверхности тела. Единственный недостаток материала - сложный уход за ним - стиральная мембрана, остальное категорически не рекомендуется.

Правила стирки

Поскольку мембрана достаточно требовательна к уходу, во избежание ее повреждения необходимо строго соблюдать правила ее стирки:

  • Длительное замачивание.Как правило, мембранные вещицы благодаря своим свойствам прекрасно моются без предварительного замачивания.
  • Деликатная стирка. Мембрану можно стирать вручную или в автоматической стиральной машине, установив самый деликатный режим и установив температурный режим не более 40 градусов.
  • Ручной отжим. Даже при стирке в автомате вещь можно отжимать исключительно вручную, крутить при этом нельзя.
  • Сушка. Мембранная одежда не должна подвергаться воздействию высоких температур - глажки, сушки на батареях отопления и т. Д.

Одежду следует сушить в горизонтальном положении на плоской поверхности. Для быстрого высыхания под вещь можно положить махровое или хлопчатобумажное полотенце.

Выбор инструмента

Мембранную одежду следует стирать исключительно, так как обычная одежда просто забивает микропоры ткани и теряет свои уникальные свойства.

С безвредной стиркой мембраны отлично справятся специализированные моющие средства для стирки одежды для занятий спортом, в том числе для полиэстера.Такие бальзамы имеют гелевую консистенцию, поэтому их частицы не повредят структуру ткани, а одежда не потеряет своих свойств. Особенно хороши DOMAL Sport Fein Fashion и Perwoll.

Nikwax Tech Wash довольно дорогой, но он специально разработан для стирки вещей из мембранной ткани. Его уникальность заключается в том, что он может восстанавливать свойства мембраны после стирки вещиц обычным стиральным порошком и - содержит водоотталкивающую пропитку, необходимую для сохранения ткани в надлежащем виде и качестве.

Недорогой гель Denkmit Fresh Sensation, разработанный специально для стирки одежды из мембранной ткани, хорошо справляется с удалением с вещей разной степени загрязнения. Недостатком этого средства является отсутствие водоотталкивающей пропитки , поэтому вещь после стирки и сушки придется дополнительно обработать специальным фторсодержащим спреем или другим средством для мембраны.

Мембранную одежду можно стирать в растворе, приготовленном из обычного хозяйственного мыла .Для приготовления продукта натрите на самой мелкой терке достаточное количество мыла и разведите его теплой водой до консистенции геля. Важно следить за тем, чтобы натертое мыло растворялось правильно, иначе даже самые мелкие комочки могут забить поры мембраны. Недостатком этого средства является невысокая очищающая способность.

Ни в коем случае не стирайте одежду из мембранного материала средствами, содержащими хлор, так как после такого воздействия вещь безвозвратно потеряет свои характерные свойства.

Чтобы не повредить ткань мембраны, вещи из нее нужно стирать вручную очень осторожно. Мембрана плохо переносит резкие воздействия, поэтому не стоит использовать стиральный порошок или старательно протирать хозяйственным мылом.

Температура воды при стирке не должна превышать сорока градусов, в идеале тридцати. Вещь аккуратно намыливают, не замачивая, а затем ополаскивают под струей воды указанной температуры. Если возникнет необходимость (загрязнения не были удалены), то можно повторять процедуру до достижения желаемого результата.

Прессовать вещи из мембранного материала , слегка отжимая . Откручивать вещь из такого материала категорически не рекомендуется - такие действия нарушат структуру и, соответственно, функциональность ткани.

Машинная стирка

При стирке в автомате важно соблюдать предельную осторожность, так как испортит мембранную вещь автоматическим удалением пятен и грязи, все очень просто - большинство производителей не рекомендуют использовать этот метод избавления от загрязнений. вообще.Алгоритм стирки следующий:

  • Вещи сортируют, потому что большие лучше стирать по одной , а маленькие можно класть в стиральную машину по 2-3 штуки за раз.
  • Выбран максимально щадящий, деликатный режим стирки с температурой не выше сорока градусов.
  • Отжим выключается.
  • После окончания цикла вам понадобится немного воды из вещи и только потом аккуратно отожмите одежду вручную.

Уход за одеждой с мембраной не так уж и сложен, если соблюдать основные правила и бережно относиться к вещам. Не используйте порошкообразные и едкие средства, своевременно обрабатывайте вещи защитными и водоотталкивающими растворами, тогда мембранная одежда не потеряет своих свойств и прослужит не один сезон.

Стирать рубашку мембраны нужно довольно часто, так как из-за пористой структуры она сильно загрязнена. Однако мало кто умеет его стирать, так как боится испортить одежду.В нашей статье мы поговорим о том, как постирать куртку с мембраной в домашних условиях в стиральной машине и вручную.

В стиральной машине

Прежде чем рассказывать, как стирать куртку с мембраной в стиральной машине, хочу уточнить, что для стирки такой вещи не используются моющие средства, содержащие хлор. . Он может значительно повредить водонепроницаемое покрытие, из-за чего куртка перестанет спасать своего владельца от дождя. Для стирки такой верхней одежды нужно купить специальный инструмент.

Куртку с мембраной нельзя замачивать перед стиркой, так как ткань может намокнуть и испортиться. Выдавливать такую ​​куртку тоже нельзя, после стирки ее следует завернуть в ткань, которая хорошо впитывает влагу.


Итак, чтобы успешно постирать куртку с мембраной в стиральной машине, необходимо выполнить следующий комплекс действий:

  • Для начала следует положить куртку в стиральную машину отдельно от других вещей. .
  • Режим стирки нужно выбирать максимально деликатный. Для стирки куртки с мембраной лучше всего подходят шерсть и ручная стирка. .
  • Отжим необходимо немедленно выключить. , поскольку во время отжима существует вероятность того, что ваша куртка с мембраной потеряет большинство своих уникальных свойств после стирки.
  • Температура воды при стирке не должна быть выше 30 градусов.
  • После стирки аккуратно достаньте одежду из стиральной машины, найдите хлопчатобумажное полотенце и оберните куртку пленкой, чтобы избавиться от лишней влаги.
  • После этого повесьте куртку в хорошо вентилируемом помещении, куда не попадают прямые солнечные лучи.

Куртку с мембраной стирать в стиральной машине допустимо, но все же ручная стирка мембранных вещей будет более подходящей, так как риск испортить одежду сведен к минимуму.

Ручная стирка

Чтобы правильно постирать куртку с мембраной в домашних условиях вручную, следует знать, что ни в коем случае нельзя замачивать перед стиркой .

Постирать куртку с мембраной вручную в домашних условиях необходимо следующим образом:

  • Сначала куртка должна быть влажной, но не оставлять ее надолго в воде, так как в этом случае защитный слой намокнет. и теряют свои свойства.
  • Возьмите специальное моющее средство для стирки куртки с мембраной, нанесите его, равномерно распределяя по поверхности.
  • После этого сполосните куртку под краном теплой водой, чтобы смыть моющее средство и не осталось разводов.
  • Сушите куртку с мембраной так же, как при стирке в стиральной машине.

Следует отметить, что ручная стирка мембранных вещей безопаснее, чем стирка в стиральной машине. Поэтому, чтобы куртку с мембраной эффективно постирать в домашних условиях, лучше отдать ей предпочтение.

Чтобы решить, как стирать мембранную куртку, сначала нужно знать, какими свойствами она обладает. Мембранная ткань имеет пористую структуру, ее материал пропитан специальным веществом, которое придает ей такие характеристики:

  • ветро-, воздухо- и водонепроницаемые;
  • сопротивление раздавливанию;
  • прочность и практичность;
  • легкий вес;
  • износостойкость.

Стирка мембранных тканей требует особого подхода и специальных моющих средств, так как использование обычного стирального порошка нарушит структуру волокон и эта вещь потеряет свои водоотталкивающие свойства. При правильном подходе выбрать их не составит труда, так как на рынке доступна широкая линейка специализированных решений, благодаря которым уход за мембранной одеждой является наиболее эффективным и безопасным.

Как стирать мембранные куртки?

Выберите и примените наиболее подходящий мембранный тканевый продукт, указанный ниже.Наиболее популярные и эффективные из них по отзывам профессионалов и хозяек следующие:

  • Perwoll Sport & Active - специальный гель для деликатной стирки. Предотвращает появление неприятного запаха, насыщает вещи приятным ароматом.
  • Nikwax Tech Wash - это средство не только удаляет загрязнения с ткани, но и восстанавливает водоотталкивающие свойства этого материала.
  • DOMAL Sport Fein Fashion - это специальная жидкость, обеспечивающая деликатный уход и сохраняющая особые функции одежды.
  • Woly Sport Textile Wash - это моющее средство для мембранных тканей, которое очищает и поддерживает водо- и воздухопроницаемость материала.

Также можно использовать народные средства. Для этого вам понадобится:

  • жидкое мыло;
  • детское мыло;
  • мыло хозяйственное.

Как помыть мембранные триггеры?

Мембранная одежда стирается только вручную, например:

  1. Разведите выбранное моющее средство в теплой воде на 30-40 градусов.
  2. Замочите загрязненный предмет не более чем на 20 минут.
  3. Аккуратно постирайте вещь, не сжимая ее сильно.
  4. Сильно загрязненные участки куртки протрите мягкой щеткой.
  5. Прополощите в теплой, а затем в холодной воде.
  6. Повесьте изделие на вешалку над ванной и дайте стечь воде, ни в коем случае не отжимая ткань.
  7. Положите куртку горизонтально вдали от солнечных лучей в хорошо вентилируемом месте.
  8. Обработайте куртку после высыхания специальной пропиткой.

Важно! Если вы решили постирать куртку хозяйственным или детским мылом, то приготовьте мыльный раствор. Вначале натрите его на терке, а затем разведите в теплой воде, дальше принцип действия тот же.

Что такое пропитка?

На производстве материал пропитывают специальным раствором с защитным составом DWR, который предотвращает проникновение воды в ткань, но с каждой стиркой его становится все меньше и меньше. Следовательно, возникает необходимость в восстановлении водоотталкивающих функций.Для этого есть средства в виде аэрозолей и жидкостей. Перед их использованием обязательно ознакомьтесь с инструкцией.

Вариант 1


При использовании пропиточной жидкости действовать следующим образом:

  1. Налейте жидкость в таз.
  2. Поместите в нее продукт.
  3. Вытащите его.
  4. Расстелить и высушить вдали от солнечных лучей.

Вариант 2

Если вы выбрали аэрозоль, нанесите его следующим образом:

  1. Повесьте сухую и чистую куртку.
  2. Возьмите водоотталкивающий спрей.
  3. Равномерно распылите его содержимое по поверхности куртки.

Важно! Не переусердствуйте с нанесением пропитки, иначе ткань потеряет дышащие свойства.

Почему бы не постирать мембранную куртку?

  • стиральные порошки - забивают поры ткани;
  • продуктов, содержащих хлор;
  • кондиционеры - закупоривают дыхательные поры тканей;
  • пятновыводители и агрессивные растворители - удалят пятна, но могут полностью испортить ткань.

Полезная информация

  • Не гладьте ткань мембраны, иначе вы повредите ее структуру, при высыхании материал самовосстанавливается.
  • Не позволять пыли забивать поры материала; хранить изделие в специальных чехлах в сухом и расправленном виде.

Теперь вы знаете, как стирать мембранные куртки, чтобы они не потеряли своих функций. Воспользуйтесь нашими советами и несомненно, эта вещь прослужит вам очень долго.

Мембранная ткань обладает высокими водоотталкивающими и грязеотталкивающими свойствами и отлично сохраняет тепло.

Одежда из такой ткани легкая, теплая и очень практичная. Что заставляет мембрану обладать такими свойствами?

Ткань сохраняет тепло за счет уникальной текстуры материала, если посмотреть в лупу, можно увидеть мелкие ячейки, которые при повышении температуры выделяют теплый воздух, а холодный, наоборот, недопустим. Получается своеобразный микроклимат для поддержания комфортной для человека температуры. Верх мембраны покрыт невидимой пленкой и обработан специальным водоотталкивающим средством.Все это позволяет ткани оставаться сухой изнутри.


Тонкости при стирке мембраны


Неудивительно, что изделия из такой ткани требуют особого ухода.

Если грязь довольно сильная, она еще не высохла, дайте ей высохнуть и очистите мягкой губкой.

Теперь можно сразу приступить к стирке, стирать нельзя, это забьет все «поры», и ткань потеряет свои чудесные свойства.

Кроме обычного порошка, при стирке мембранных тканей нельзя использовать кондиционер, отбеливатель, хлорсодержащие вещества и другие агрессивные средства.


Поэтому мы используем только специальное моющее средство для мембран Как правило, жидкое.

В инструкции к средству указано, что использовать его можно, но для сохранения изделия на долгое время рекомендуем стирать его вручную.

Итак, берем нужную сумму средств и следуем инструкции. Не забудьте надеть перчатки.

В таз наливаем в небольшом количестве воду, не превышающую 40 градусов, наливаем туда моющее средство для мембраны, перемешиваем и погружаем в раствор наш продукт.Дайте ткани намокнуть и приступайте к стирке.

Ни в коем случае не три, стираем только дробящими движениями.


Затем тщательно промойте в холодной воде (более трех раз) и, не отжимая, развесьте слив над ванной.

Желательно на ровной поверхности, аккуратно разложив все складки. В помещении должно быть свежо и прохладно, недопустимо пребывание на солнце одежды. Не сушите на батареях или других радиаторах.


После каждой стирки на мембрану обязательно наносится пропитка.Когда продукт высохнет, нанесите специальный спрей на чистую и сухую ткань. Затем, не смывая, дайте впитаться и через два-три часа смело используйте.

Данная процедура необходима, так как при стирке смывается старая пропитка.

Если не обработать ткань снова, она не защитит вас так эффективно, как перед стиркой. Это средство можно купить в любых специализированных магазинах или в Интернете. Некоторые поставщики также продают пропитку для разливов. Это удобно, если бюджет ограничен, но экономичнее, конечно, купить целую бутылку.

Мыло хозяйственное или детское


Помимо специальных средств для стирки мембранной одежды, можно использовать обычное хозяйственное или детское мыло. Действуем по следующему алгоритму:

  • растворить мыло в воде;
  • погрузите одежду в мыльную воду;
  • протереть в загрязненных местах мягкой губкой без давления;
  • ополосните и дайте воде стечь по ванне, не отжимая.

Автоматическая мембранно-моечная машина

Большинство мембранных изделий нельзя стирать в стиральной машине, но есть одежда из плотной ткани и такой уход возможен.

Читайте также: Стиральная машина не отжимает


Эта информация отражена на бирке; прочтите внимательно. Если вы решили машинную стирку, учитывайте такие моменты, как:

  • стирать только при;
  • без отжима и полоскания:
  • без моющих средств.

В случае сильного загрязнения стиральная машина может не справиться и изделие нужно будет повторно выстирать вручную.

Какие моющие средства для стирки мембранной одежды можно купить

Вот некоторые производители средств по уходу за мембранами:

Кроме того, его можно использовать для тканей из полиэстера.

Цена намного ниже других средств.